| EL-4荷瘤鼠单链噬菌体抗体库的构建 |
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| 引用本文： | 秦燕,张杰.EL-4荷瘤鼠单链噬菌体抗体库的构建[J].大理学院学报,2007,6(2):15-17. |
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| 作者姓名： | 秦燕 张杰 |
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| 作者单位： | 1. 大理学院基础医学院生理、病理生理学教研室,云南大理,671000
2. 四川大学华西临床医学院,四川成都,610000 |
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| 摘 要： | 目的:构建一个EL-4荷瘤鼠的单链噬菌体抗体库,为筛选高特异性和高亲和力的单链抗体做准备.方法:于C57小鼠腋区接种EL-4细胞,待肿瘤长大后,从脾细胞中提取总RNA,RT-PCR技术扩增小鼠抗体重、轻链可变区基因(VH、VL),用Linker奖VH和VL基因连成单链抗体可变区片段(scFv).双酶切后(Not Ⅰ、Sfi Ⅰ)与预备好的pCANTAB5E噬粒载体连接,转化入感受态TG1,构建EL-4荷瘤鼠的单链噬茵体抗体库.随机抽取转化后的20个克隆,用以检测外源DNA的转入情况.结果:PCR扩增出的VH约有340bp和VL约有320bp,scFv的长度约有750bp.转化后的TG1约有1.67×107个茵落,随机挑取20个克隆,双酶切显示五分之一的茵落转化了外源DNA片段,有效库容为3.34×106.结论:成功构建了EL-4荷瘤鼠的单链噬茵体抗体库.
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| 关 键 词： | EL-4细胞 噬菌体抗体库 |
| 文章编号： | 1672-2345（2007）02-0015-03 |
| 收稿时间： | 2006-11-06 |
| 修稿时间： | 2006年11月6日 |
Construction of single-chain phage antibody library of cancer-bearing EL-4 mice |
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| QIN Yan,ZHANG Jie.Construction of single-chain phage antibody library of cancer-bearing EL-4 mice[J].Journal of Dali University,2007,6(2):15-17. |
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| Authors: | QIN Yan ZHANG Jie |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | EL-4 cells phage antibody library |
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