| 微孔板化学发光酶免疫分析法定量检测肿瘤标志物CA72-4的方法学研究 |
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| 引用本文： | 靳辉,王栩,辛天兵,高鹏,林金明,梁淑轩.微孔板化学发光酶免疫分析法定量检测肿瘤标志物CA72-4的方法学研究[J].科学通报,2008,53(13):1538-1543. |
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| 作者姓名： | 靳辉 王栩 辛天兵 高鹏 林金明 梁淑轩 |
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| 作者单位： | 河北大学化学与环境科学学院，清华大学化学系 北京100084，清华大学化学系，河北大学化学与环境科学学院，清华大学化学系，北京100084，北京科美东雅生物技术有限公司，清华大学化学系，河北大学化学与环境科学学院，保定071002，北京100084，保定071002，北京100094，北京100084，保定071002 |
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| 基金项目： | 国家重点基础研究发展计划(批准号: 2007CB714507)和国家高技术研究发展计划(批准号: 2006AA02Z4A8)资助项目 |
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| 摘 要： | 建立了一种高灵敏、高特异检测人血清中肿瘤标志物CA72-4的微孔板化学发光酶免疫分析法. 采用双抗体夹心反应模式, 以过氧化氢(H2O2)-鲁米诺(luminol)化学发光体系作为检测体系, 以辣根过氧化物酶作为标记物, 测定简便、快速. 对几种物理化学参数, 如温育条件、抗体包被条件、酶标记物稀释度和发光反应时间进行了考察和优化. 结果显示方法的线性范围为0～200 U/mL, 相关系数0.9995, 检出限为0.18 U/mL, 批内、批间变异均小于10%. 检测CA72-4的临床低值血清回收率为98.5%, 高值血清回收率为101.3%, 显示了良好的准确性. 与人体血清中常见肿瘤标志物甲胎蛋白(AFP), 癌胚抗原(CEA), CA24-2, CA19-9, CA15-3无明显交叉. 为了验证该法用于构建临床诊断试剂盒的可行性, 对所用试剂进行了37℃下的7 d热稳定性考察, 各技术指标与4℃放置7 d无明显差异. 对50例临床血样进行了测定, 并与进口酶联诊断试剂盒测值呈良好相关(r2 = 0.9383). 这些结果均表明该方法稳定、可靠、实用, 可以满足商品化试剂盒的开发, 在临床CA72-4检测及癌症辅助诊断中具有较高的应用价值.
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| 关 键 词： | 化学发光酶免疫分析 肿瘤标志物 CA72-4 人血清 |
| 收稿时间： | 2008-01-18 |
| 修稿时间： | 2008-05-16 |
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