人载脂蛋白基因αpoAⅠ在毕赤氏酵母中的胞内表达 |
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引用本文: | 杨婷婷,赵志安,张彦,宋大新.人载脂蛋白基因αpoAⅠ在毕赤氏酵母中的胞内表达[J].复旦学报(自然科学版),2004,43(6):1035-1038. |
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作者姓名: | 杨婷婷 赵志安 张彦 宋大新 |
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作者单位: | 复旦大学生命科学学院,上海200433 |
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摘 要: | 将PCR扩增得到的αpoAⅠ基因片段插入胞内表达质粒pPIC3.5K,重组的pPIC3.5K-αpoAⅠ用BglⅡ酶切后,转化Pichia pastoris GS115菌株,筛选获得G418高抗性转化子,再通过PCR鉴定证实口αpoAⅠ基因已整合到染色体上.其转化子经摇瓶发酵和甲醇诱导,收集细胞裂解后,用SDS-PAGE与Western blotting检测,证明胞内有明显的rApoAⅠ表达,其分子质量与人血浆提取的ApoAⅠ相同.
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关 键 词: | 表达质粒 ApoAⅠ 载脂蛋白 基因 人血浆 再通 诱导 毕赤氏酵母 转化子 细胞裂解 |
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