| 细菌Ⅱ型分泌途径控制产碱假单胞菌(Pseudomonas alcaligenes) S2中卵磷脂酶的分泌 |
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| 引用本文： | 吕静,李繁,陈三凤,李季伦.细菌Ⅱ型分泌途径控制产碱假单胞菌(Pseudomonas alcaligenes) S2中卵磷脂酶的分泌[J].科学通报,2005,50(16):1725-1730. |
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| 作者姓名： | 吕静 李繁 陈三凤 李季伦 |
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| 作者单位： | 1. 中国农业大学农业生物技术国家重点实验室,北京,100094
2. 中国农业大学农业生物技术国家重点实验室,北京,100094;中国农业大学农业部微生物资源及其应用重点实验室,北京,100094
3. 中国农业大学农业生物技术国家重点实验室,北京,100094;中国农业大学生物学院,北京,100094 |
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| 基金项目： | 致谢 本工作为国家重点基础研究发展规划资助项目（批准号：001CB108904）. |
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| 摘 要： | 从水稻根际分离筛选出1株降解卵磷脂的有机磷降解细菌菌株S2, 通过形态指标、生理生化性状、16S rDNA序列、(G+C)含量以及DNA-DNA杂交分析, 鉴定为产碱假单胞菌(Pseudomonas alcaligenes). 采用双亲接合的方法将带有Tn5转座子的质粒导入产碱假单胞菌S2菌株中进行转座子插入诱变, 从5000个卡那霉素抗性的Tn5插入突变株中, 筛选到3株丧失解磷能力的突变株(M808, M1329和M1400)和1株解磷能力增强的突变株(M20). 对Tn5插入位点的基因进行DNA测序表明, 丧失解磷能力突变株中被突变的基因分别是xcpS, xcpX和xcpW, 它们分别编码XcpS, XcpX和XcpW蛋白, 这些蛋白是细菌Ⅱ型分泌途径中的主要成分. 将xcpS, xcpX和xcpW基因分别构建在pLAFR3载体上, 通过双亲接合的方式分别导入上述M808, M1329和M1400三个丧失解磷能力突变株中进行功能互补实验, 结果表明这3个基因都能使各自相对应的突变株恢复解磷能力. 以上结果表明, 在产碱假单胞菌中卵磷脂酶的分泌是通过Ⅱ型分泌途径来完成的. 解磷能力的丧失可能是由于Tn5插入xcp基因簇中的某一基因破坏了卵磷脂酶向胞外的分泌, 造成突变株不能降解有机磷. 在解磷能力增强突变株M20中, 被突变的基因与铜绿假单胞菌(Pseudomonas aeruginosa) PAO1中的chpA基因(参与细菌的颤动)同源性达88%.
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| 关 键 词： | Pseudomonas alcaligenes 有机磷降解 Tn5转座子 xcpS xcpX xcpW chpA |
| 收稿时间： | 2005-04-11 |
| 修稿时间： | 2005-04-112005-06-17 |
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