| 人NOD8基因启动子绿色荧光蛋白表达载体的构建与鉴定 |
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| 引用本文： | 曾琪,胡巢凤,孙丽萍,陆大祥.人NOD8基因启动子绿色荧光蛋白表达载体的构建与鉴定[J].暨南大学学报,2009,30(2). |
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| 作者姓名： | 曾琪 胡巢凤 孙丽萍 陆大祥 |
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| 作者单位： | 暨南大学医学院病,理生理学教研室,发热研究室,广东,广州,510632 |
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| 基金项目： | 广东省自然科学基金，广东省教育厅自然科学基金 |
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| 摘 要： | 目的:构建人NOD8基因启动子的绿色荧光蛋白表达载体.方法:用特定的限制性内切酶位点,以人基因组DNA为模板,PCR扩增含有人NOD8基因启动子不同长度2段序列,并进行酶切以切除启动子的pEGFP-C2作框架结构,插入表达载体pEGFP-C2中,构建含有人NOD8基因启动子驱动的绿色荧光蛋白载体pEGFP-C2-NOD8(520 bp)、pEGFP-C2-NOD8(760 bp),用Vsp Ⅰ和Nhe Ⅰ双酶切和PCR鉴定重组质粒,再将重组质粒进行DNA序列分析.构建的重组质粒经脂质体(lipofectamine)TM2000介导转染HEK293、K562和HeLa细胞,转染48 h后在倒置荧光显微镜下观察.结果:pEGFP-C2-NOD8(520 bp)、pEGFP-C2-NOD8(760 bp)分别经酶切鉴定和序列测定证实目的基因已插入重组质粒;细胞转染结果表明,构建的2段重组质粒转染HEK293、K562及HeLa细胞均能表达绿色荧光,其中构建的pEGFP-C2-NOD8(760 bp)重组质粒绿色荧光表达强于pEGFP-C2-NOD8(520 bp).结论:成功构建2段不同长度的人NOD8基因启动子绿色荧光蛋白表达载体.
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| 关 键 词： | 核苷酸结合寡聚化结构域8启动子(NOD8启动子) 载体 绿色荧光蛋白 基因表达 |
Construction of GFP expression vector drived by promoter of human NOD8 gene |
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| ZENG Qi,HU Chao-feng,SUN Li-ping,LU Da-xiang.Construction of GFP expression vector drived by promoter of human NOD8 gene[J].Journal of Jinan University(Natural Science & Medicine Edition),2009,30(2). |
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| Authors: | ZENG Qi HU Chao-feng SUN Li-ping LU Da-xiang |
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| Institution: | Department of Pathophysiology;Institute of Fever Research;Medical College;Jinan University;Guangzhou 510632;China |
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