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| 枝状枝孢霉MD2的Unigene A03231的克隆及原核表达分析 | |
| 作者姓名： | 张鹏 周兰 席晓圆 德格 柯友胜 刘盼 宋发军 |
| 作者单位： | 中南民族大学生命科学学院生物技术国家民委重点实验室/武陵山区特色资源植物种质保护与利用湖北省重点实验室; |
| 基金项目： | 国家自然科学基金资助项目(31370118); 湖北省本科高校“生物技术专业综合改革”试点资助项目(GJZ15006);中南民族大学基本科研业务费专项基金（CZW15019）;校企合作资助项目（HZY14024）; 中南民族大学大学生创新创业资助项目(SCX1725, GCX1725, SKYCX17020) |
| 摘 要： | 为研究真菌紫杉醇合成相关基因的功能,从产紫杉醇真菌枝状枝孢霉MD2中克隆了Unigene A03231的DNA和c DNA全长序列(918 bp).结果表明:该基因不含内含子,其编码产物含305个氨基酸,与短链脱氢酶/还原酶一致性为64%,预测蛋白分子量为33071.5 Da,不存在信号肽,含有2个跨膜结构.Unigene A03231以单拷贝形式存在于基因组,在0~30 h内其表达水平随茉莉酸甲酯诱导表现为先升高后降低.构建了该基因的原核表达菌株,初步优化了其在大肠杆菌BL21中的诱导表达条件为:诱导温度28℃,IPTG浓度0.6 mmol/L,诱导时间8 h.为深入分析该基因的催化功能奠定了基础. |
| 关 键 词： | 枝状枝孢霉 紫杉醇 基因 克隆 原核表达 |
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