重组人巨细胞病毒(HCMV)嵌合肽在毕赤酵母中的表达 |
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引用本文: | 董鲁,谢琪璇,潘善培,肖銮娟,刘红军.重组人巨细胞病毒(HCMV)嵌合肽在毕赤酵母中的表达[J].暨南大学学报,2003,24(1):73-78. |
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作者姓名: | 董鲁 谢琪璇 潘善培 肖銮娟 刘红军 |
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作者单位: | 暨南大学生殖免疫研究中心,广东,广州,510632 |
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基金项目: | 深圳市科委科技计划项目 |
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摘 要: | 目的:在巴期德毕赤酵母中表达人巨细胞病毒gp52C末端和pp150C末端串联片段的嵌合肽,方法:用SacI和BglⅡ分别酶切CMVp-pPIC9K重组质粒,电打孔法导入毕赤酵母GS115后,在缺组氨酸的MD板上筛选出转化子,然后根据甲醇利用快速型(Mut^ )和甲醇利用缓慢型(Mut^s)菌株的不同生长特点,筛选出Mut^ 和Mut^s型转化子,用PCR法进一步鉴定阳性克隆,分别用甲醇诱导Mut^ 和Mut^s型转化子表达目的蛋白4d,取培养产物冻干浓缩,进行SDS-PAGE和Western blotting,筛选出能特异表达目的的蛋白的菌株,分析蛋白的含量及纯度。结果:重组人巨细胞病毒可在甲醇利用快速型毕赤酵母中有效表达,其表达量约占培养上清分泌蛋白的76.5%,结论:重组人巨细胞病毒(HCMV)嵌合肽可在真核细胞毕赤酵母中成功表达。
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关 键 词: | 重组人巨细胞病毒 HCMV 嵌合肽 毕赤酵母 基因表达 基因工程 病毒检测 |
文章编号: | 1000-9965(2003)01-0073-06 |
修稿时间: | 2002年10月30 |
Expression of the recombinant peptide of human cytomegalovirus (HCMV) in the Pichia pastoris |
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Abstract: | |
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Keywords: | human cytomegalovirus(HCMV) recombinant peptides Pichia pastoris |
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