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重组人巨细胞病毒(HCMV)嵌合肽在毕赤酵母中的表达
引用本文:董鲁,谢琪璇,潘善培,肖銮娟,刘红军.重组人巨细胞病毒(HCMV)嵌合肽在毕赤酵母中的表达[J].暨南大学学报,2003,24(1):73-78.
作者姓名:董鲁  谢琪璇  潘善培  肖銮娟  刘红军
作者单位:暨南大学生殖免疫研究中心,广东,广州,510632
基金项目:深圳市科委科技计划项目
摘    要:目的:在巴期德毕赤酵母中表达人巨细胞病毒gp52C末端和pp150C末端串联片段的嵌合肽,方法:用SacI和BglⅡ分别酶切CMVp-pPIC9K重组质粒,电打孔法导入毕赤酵母GS115后,在缺组氨酸的MD板上筛选出转化子,然后根据甲醇利用快速型(Mut^ )和甲醇利用缓慢型(Mut^s)菌株的不同生长特点,筛选出Mut^ 和Mut^s型转化子,用PCR法进一步鉴定阳性克隆,分别用甲醇诱导Mut^ 和Mut^s型转化子表达目的蛋白4d,取培养产物冻干浓缩,进行SDS-PAGE和Western blotting,筛选出能特异表达目的的蛋白的菌株,分析蛋白的含量及纯度。结果:重组人巨细胞病毒可在甲醇利用快速型毕赤酵母中有效表达,其表达量约占培养上清分泌蛋白的76.5%,结论:重组人巨细胞病毒(HCMV)嵌合肽可在真核细胞毕赤酵母中成功表达。

关 键 词:重组人巨细胞病毒  HCMV  嵌合肽  毕赤酵母  基因表达  基因工程  病毒检测
文章编号:1000-9965(2003)01-0073-06
修稿时间:2002年10月30

Expression of the recombinant peptide of human cytomegalovirus (HCMV) in the Pichia pastoris
Abstract:
Keywords:human cytomegalovirus(HCMV)  recombinant peptides  Pichia pastoris
本文献已被 CNKI 维普 万方数据 等数据库收录!
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