| 马克斯克鲁维酵母表达系统菊粉酶启动子的改造及活性研究 |
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| 引用本文： | 胡晓悦,周峻岗,余垚,吕红. 马克斯克鲁维酵母表达系统菊粉酶启动子的改造及活性研究[J]. 复旦学报(自然科学版), 2017, 56(4) |
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| 作者姓名： | 胡晓悦 周峻岗 余垚 吕红 |
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| 作者单位： | 1. 复旦大学 生命科学学院 遗传工程国家重点实验室,上海,200438;2. 复旦大学 生命科学学院 遗传工程国家重点实验室,上海200438;上海工业菌株工程技术研究中心,上海200438 |
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| 基金项目： | 国家高技术研究发展计划项目，上海市科委基地项目 |
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| 摘 要： | 马克斯克鲁维酵母(Kluyveromyces marxianus)作为一种食品安全级酵母,具有生长快,生物量高等特点,是一种新型的重组蛋白表达的宿主系统.启动子是供RNA聚合酶识别和结合的DNA序列,调控着转录的起始过程,直接影响基因的表达水平.本文通过易错PCR技术对马克斯克鲁维酵母菊粉酶启动子Pinu进行两轮突变,以阿魏酸酯酶(Est1E)作为报告基因,经筛选、鉴定获得了5个可以显著提高外源蛋白表达量的突变型启动子Pm1D81、Pm1F138、Pm2Q89、Pm2M73、Pm2X47,报告蛋白Est1E的酶活性是启动子改造前的2.31,2.65,5.01,5.40,5.43倍.随后测试了启动子Pm2X47对外源蛋白甘露聚糖酶和赤霉烯酮降解酶表达的影响,结果显示这两种酶的表达量均有提高,分别是启动子改造前的3.57倍和4.13倍.上述结果提示,改造后的菊粉酶启动子在提高外源蛋白表达水平方面具有一定的通用性,可作为新型候选表达元件,以提升马克斯克鲁维酵母重组表达外源蛋白的能力.
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| 关 键 词： | 马克斯克鲁维酵母 表达系统 启动子 优化改造 |
Study on the Transformation and Activity of the Inulinase Promoter in Kluyveromyces marxianus |
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| HU Xiaoyue,ZHOU Jungang,YU Yao,L Hong. Study on the Transformation and Activity of the Inulinase Promoter in Kluyveromyces marxianus[J]. Journal of Fudan University(Natural Science), 2017, 56(4) |
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| Authors: | HU Xiaoyue ZHOU Jungang YU Yao L Hong |
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| Affiliation: | HU Xiaoyue,ZHOU Jungang,YU Yao,L(U) Hong |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | Kluyveromyces marxianus expression system promoter transformation and optimization |
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