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| hIL-2／IFN-1嵌合基因原核表达质粒的构建与表达 | |
| 作者姓名： | 邵亚明 田泽维 罗发兴 陈光明 杨富强 |
| 作者单位： | 华南理工大学轻工与食品学院 广东广州510640(邵亚明，罗发兴)，解放军458医院全军肝病研究中心 广东广州510602(田泽维，陈光明)，解放军458医院全军肝病研究中心 广东广州510602(杨富强) |
| 基金项目： | 国家高技术研究发展计划 (86 3计划 )资助项目(2 0 0 1AA2 1714 1) |
| 摘 要： | 为构建hIL 2 /IFN γ 嵌合基因原核表达质粒 ,筛选其高效表达工程菌 ,设计特异性引物 ,PCR扩增目的基因并克隆至pPROEXHTb质粒NcoⅠ /HindⅢ位点 ,经双酶切及序列测定筛选阳性克隆 ,IPTG诱导工程菌后以SDS PAGE电泳鉴定目的蛋白的表达情况 ,并测定其抗原性和生物学活性 ,结果成功构建了工程菌Top10F’[hIL 2 /IFN γ],经优化表达条件后 ,目的蛋白表达量约占菌体总蛋白的 30 % ,分子质量约为 34ku .ELISA和Western blot实验结果表明 ,目的蛋白能特异性结合抗IFN γ 抗体 ,呈阳性反应 ,生物学活性测定显示其IL 2和IFN γ 比活性分别为 1 7× 10 7U/mg与 3 2× 10 6 U/mg . |
| 关 键 词： | 白细胞介素-2 干扰素-1 嵌合基因 表达 大肠杆菌 |
| 文章编号： | 1000-565X(2005)01-0084-04 |
| 修稿时间： | 2004-04-13 |
| 本文献已被 CNKI 等数据库收录！ | |