| 番茄红素β-环化酶基因（LcyB）启动子调控LcyB RNAi双元载体构建 |
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| 引用本文： | 莫爱琼, 文了, 黎海燕, 马丽, 万小荣. 番茄红素β-环化酶基因（LcyB）启动子调控LcyB RNAi双元载体构建[J]. 华南师范大学学报（自然科学版）, 2016, 48(4): 50-56. DOI: 10.6054/j.jscnun.2016.06.002 |
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| 作者姓名： | 莫爱琼 文了 黎海燕 马丽 万小荣 |
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| 作者单位： | 1.（仲恺农业工程学院生命科学学院,广州 510225） |
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| 基金项目： | 广东省科技计划项目(2013B020303003);广东省教育厅科技创新项目和创新强校专项工程项目(2013KJCX0104);广东省自然科学基金项目(2016A030313370);2015年度国家级大学生创新创业训练计划项目(201511347003) |
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| 摘 要： | 根据番茄基因组DNA序列信息设计引物进行PCR扩增了Micro-Tom中番茄红素-环化酶（Lycopene -cyclase, LcyB）基因起始密码子上游1 534 bp启动子区域序列（LcyBp）,生物信息学分析表明,该启动子序列中存在TATA-盒、CAAT-盒、昼夜节律响应元件Circadian、光响应元件Box I、真菌激发子响应元件Box-W1、低温响应元件LTR、响应赤霉素的作用元件P-box、乙烯响应元件ERE、响应生长素的作用元件TGA-element等顺式作用元件. 依据番茄LcyB基因序列,设计2对含有不同酶切位点的特异引物进行PCR扩增LcyB基因3端特异的276 bp DNA片段,利用RNAi载体pKANNIBAL构建了LcyB启动子-LcyB基因正义片段（Sense）-PDK内含子-LcyB基因反义片段（Antisense）-OCS终止子的RNAi表达框,并将这一RNAi表达框插入植物双元表达载体pART27的Not I位点,构建成本研究的LcyB启动子驱动的LcyB基因RNAi植物双元表达载体pART-LcyBp-RNAi-LcyB. 为利用RNAi技术特异性敲除LcyB基因进而提高番茄果实中番茄红素含量奠定实验基础.
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| 关 键 词： | 番茄 番茄红素β-环化酶（Lycopene β-cyclase LcyB） 启动子 RNAi双元载体 |
| 收稿时间： | 2015-10-10 |
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