克隆颜色鉴定结合5-氟乳清酸负筛提高三杂交系统筛库效率 |
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作者姓名: | 何元政 包雷 刘定干 |
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作者单位: | 中国科学院上海生命科学研究院生物化学与细胞生物学研究所! 上海 200031,中国科学院上海生命科学研究院生物化学与细胞生物学研究所! 上海 200031,中国科学院上海生命科学研究院生物化学与细胞生物学研究所! 上海 200031 |
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基金项目: | 国家“863”计划项目!(批准号: 863-102-11-03-04) |
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摘 要: | 酵母三杂交系统是新近发展起来的一个分析RNA结合蛋白的有力工具, 然而在利用该系统筛库过程中, 常会遇到大量假阳性克隆. 将克隆颜色鉴定与5-氟乳清酸负性筛选相结合, 运用到酵母三杂交系统的筛库过程中, 极大地提高了筛库的效率和对假阳性克隆的鉴别, 并已实现了对重要的RNA结合蛋白的筛选. 这一改进将大大方便该系统在分析RNA与蛋白的相互作用中的运用.
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关 键 词: | 克隆颜色鉴定 5-氟乳清酸负性筛选 酵母三杂交系统 RNA结合蛋白 |
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