| 植物幼小原胚的电激转化 |
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| 作者姓名： | 李师弿 王胜华 杨弘远 |
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| 作者单位： | 武汉大学生命科学学院发育生物学研究中心,武汉,430072;武汉大学生命科学学院发育生物学研究中心,武汉,430072;武汉大学生命科学学院发育生物学研究中心,武汉,430072 |
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| 基金项目： | 国家自然科学基金!（批准号：39730260）,国家重点基础研究发展规划!（批准号：G1999053908） |
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| 摘 要： | 用电激法将外源报告基因导入植物原胚获得瞬间表达．用酶解和显微解剖法分离出烟草含８～３２个细胞的幼小原胚与含２５０～４００个细胞的球形胚,导入ＧＵＳ和ＧＦＰ基因后,置于ＫＭ８ｐ培养基 １～２ｄ．当电场强度为 ５００～１５００ Ｖ／ｃｍ时,可检测到 ＧＵＳ蓝色反应和 ＧＦＰ绿色荧光,其中幼小原胚在电场强度为 ７５０ Ｖ／ｃｍ时,外源基因瞬间表达频率最高,为 ２．２％,球形胚在电场强度为１２５０ Ｖ／Ｃｍ时表达频率最高为 ５．９％．若以转化细胞占胚细胞总数的比例为有效转化频率,则幼小原胚的有效转化频率约为球形胚的７倍．
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| 关 键 词： | 电激 GUS GFP 原胚 烟草 |
| 收稿时间： | 1999-07-08 |
| 修稿时间： | 1999-12-14 |
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