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利用ubi1内含子增强Bt cry1Ah基因在转基因玉米中的表达
引用本文:王悦冰,郎志宏,张杰,何康来,宋福平,黄大昉.利用ubi1内含子增强Bt cry1Ah基因在转基因玉米中的表达[J].科学通报,2008,53(17):2041-2046.
作者姓名:王悦冰  郎志宏  张杰  何康来  宋福平  黄大昉
作者单位:中国农业科学院生物技术研究所,中国农业科学院植物保护研究所,植物病虫害生物学国家重点实验室
基金项目:国家自然科学基金 (批准号: 30500039)、国家重点基础研究发展计划(批准号: 2003CB114201)、中央级公益性科研院所基本科研业务费专项资金(中国农业科学院生物技术研究所)资助项目
摘    要:Bt cry1Ah基因是从国内苏云金芽胞杆菌分离株BT8中鉴定克隆的新型杀虫蛋白基因. 本研究构建了两个含有Bt cry1Ah基因的植物表达载体, 在其中一个植物表达载体(pUUOAH)的玉米Ubiquitin启动子与cry1Ah基因之间插入了玉米泛素蛋白基因ubiqutin1的第一个内含子(ubi1). 利用基因枪法将其导入玉米(Zea mays L.)胚性愈伤组织中, 得到了可育的再生植株. PCR及Southern blot检测结果表明, cry1Ah基因已整合入玉米基因组中, 并稳定遗传至下一代. 对T1及T2代转基因植株进行ELISA检测, 发现pUUOAH载体转基因植株Cry1Ah蛋白的平均表达量提高了20%. 对T2代转基因植株进行了田间抗虫性鉴定, 发现转cry1Ah基因玉米对玉米螟有很高的抗性, 并且pUUOAH载体转基因植株的抗虫性好于pUOAH(无内含子)载体的转基因植株. 以上结果表明, 玉米ubi1内含子可以有效增强cry1Ah在转基因玉米中的表达.

关 键 词:Bacillus  thuringiensis  cry1Ah基因  ubi1内含子  内含子增强效应  抗虫转基因玉米
收稿时间:2008-03-06
修稿时间:2008-04-29
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