| 利用反向遗传学技术获得适应RK13细胞的兔出血症病毒 |
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| 引用本文： | 刘光清,倪征,云涛,张玉颖,杜青云,盛祖恬,梁华丽,华炯刚,李双茂,陈剑平.利用反向遗传学技术获得适应RK13细胞的兔出血症病毒[J].科学通报,2006,51(13):1541-1544. |
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| 作者姓名： | 刘光清 倪征 云涛 张玉颖 杜青云 盛祖恬 梁华丽 华炯刚 李双茂 陈剑平 |
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| 作者单位： | 1. 浙江省农业科学院病毒学与生物技术研究所,农业部病毒学与生物技术重点实验室,杭州,310021
2. 浙江省农业科学院病毒学与生物技术研究所,农业部病毒学与生物技术重点实验室,杭州,310021;甘肃农业大学动物医学院,兰州,730070 |
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| 基金项目： | 本工作为浙江省自然科学基金资助项目（批准号：Y305047）. |
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| 摘 要： | 在前期构建的兔出血症病毒(rabbit hemorrhagic disease virus, RHDV)全长cDNA分子的基础上, 利用SP6 RNA聚合酶系统, 在体外转录合成了病毒RNA. 用转染试剂将病毒RNA导入RK13细胞, 12 h后可见明显致细胞病变(CPE), 用间接免疫荧光方法在RK13细胞中检测到了病毒抗原的产生. 将收获的细胞培养物再次接种RK13细胞, 仍然能产生明显病变. 大量收取细胞培养物, 经差速离心法纯化病毒后, 在电子显微镜下可观察到RHD病毒粒子. 结果表明, 利用反向遗传学技术获得了可适应于RK13培养的RHDV, 为将来研究RHDV的分子致病机理和新型疫苗等提供了有利的工具.
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| 关 键 词： | 兔出血症病毒 反向遗传学 全长cDNA RK13细胞 |
| 收稿时间： | 2006-01-17 |
| 修稿时间： | 2006-01-172006-05-19 |
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