杂交法检测重组乙型肝炎疫苗(汉逊酵母)发酵产物HBsAg外源基因拷贝数 |
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作者姓名: | 张海春 李贵兴 陈广东 张平 范艳云 |
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作者单位: | 1.大连汉信生物制药有限公司,辽宁大连,116600;2.大连汉信生物制药有限公司,辽宁大连,116600;3.大连汉信生物制药有限公司,辽宁大连,116600;4.大连汉信生物制药有限公司,辽宁大连,116600;5.大连汉信生物制药有限公司,辽宁大连,116600 |
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摘 要: | 以汉逊酵母宿主基因组DNA和发酵产物基因组DNA的相同MOX启动子的片断为特异性探针,用地高辛标记后,与固定在杂交膜上的宿主基因组DNA和发酵产物基因组DNA进行杂交并显色,根据显色深度来判定发酵产物中外源基因拷贝数的大小。结果表明,发酵产物中HBsAg外源基因拷贝数不小于30个。该方法检测灵敏度较好,特异性较强,操作较安全,可用于重组汉逊酵母发酵产物中HBsAg外源基因拷贝数定性检测。
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关 键 词: | 宿主菌基因组DNA 发酵产物基因组DNA 外源基因拷贝数 Host genomic DNA fermentation products genomic DNA foreign gene copy number |
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