| 谷胱甘肽合成酶系基因协调表达体系的构建 |
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| 引用本文： | 尧辉,魏东芝,周宇荀,沈立新,刘寿春. 谷胱甘肽合成酶系基因协调表达体系的构建[J]. 华东理工大学学报(自然科学版), 2002, 28(2): 144-148 |
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| 作者姓名： | 尧辉 魏东芝 周宇荀 沈立新 刘寿春 |
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| 作者单位： | 华东理工大学生物反应器工程国家重点实验室,生物化学研究所,上海,200237;Department of Vascular Biology, The Scripps Research Institute, La Jolla CA 92037, USA |
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| 基金项目： | 教育部高等学校重点实验室访问学者基金资助,上海市重点学科资助项目,上海市生物工程重点学科建设资助项目 |
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| 摘 要： | 通过 PCR获得 E.coli B谷胱甘肽合成酶系基因 ( gsh I,gsh II)片段 ,结合定点突变稀有起始密码子 ,设定 gsh I与 gsh II位置与距离 ,构建双顺反子重组表达载体 p Trc99A/gsh I- gsh II,建立GSHI、GSH- II蛋白表达体系。结果表明 :以 0 .0 8mmol/L IPTG于 2 8℃诱导工程菌 E.coli BL2 1( DE3) ( p Trc99A/gsh I- gsh II) ,GSH- I、GSH- II蛋白比为 4.5∶ 1 ( m∶ m)时谷胱甘肽合成能力最高 ,达到每克湿菌体 8.5 mg。通过构建单顺反子重组表达载体 p Trc99A/gsh I、p Trc99A/gsh II测定GSH- I与 GSH- II蛋白的最适配比 ,结果表明 :在 GSH- I、GSH- II蛋白总量恒定的情况下 ,要提高谷胱甘肽产率 ,两者比例以 3∶ 1～ 6∶ 1为宜
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| 关 键 词： | 谷胱甘肽 合成酶系 蛋白表达体系 双顺反子重组表达载体 协调表达 |
| 文章编号： | 1006-3080(2002)02-0144-05 |
| 修稿时间： | 2001-04-26 |
Construction of Coordinated Expression System of gshI and gshIIGene for Improving the GSH Synthesis Capability of E.coli |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | glutathione synthetase protein expression system two cistrons recombinant expression vector coordinated expression |
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