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昆明鼠乙酰胆碱酯酶基因克隆与表达
引用本文:张立媛,李娜,张建华,杨俊忠,张华,杨雪婷,袁永泽,刘德立. 昆明鼠乙酰胆碱酯酶基因克隆与表达[J]. 华中师范大学学报(自然科学版), 2008, 42(4): 597-601
作者姓名:张立媛  李娜  张建华  杨俊忠  张华  杨雪婷  袁永泽  刘德立
作者单位:华中师范大学,生命科学学院,武汉,430079;华中师范大学,生命科学学院,武汉,430079;华中师范大学,湖北省遗传调控与整合生物学重点实验室,武汉,430079
基金项目:国家重点基础研究发展计划(973计划),高等学校博士学科点专项科研项目,211重点学科建设项目,湖北省科技攻关项目,湖北省武汉市科技攻关项目 
摘    要:
乙酰胆碱酯酶(ACHE)作为有机磷和氨基甲酸酯类农药的最适反应底物,在农药残留的快速检测中得到广泛应用,本实验根据家鼠AChE全基因序列设计并合成一对特异性引物,对昆明鼠脑组织AchE进行RT-PCR扩增,扩增产物经T-载体克隆、酶切鉴定和测序分析,结果表明:昆明鼠AChE编码序列长1845bp.经BLAST比对发现该序列与已报道序列(No.BC046327)的同源性为99.78%.构建原核重组表达质粒pET-AChE,并在E.coli中得到高效表达,表达蛋白的分子量约为68000.运用改进的Ellman法成功检测到重组表达蛋白的活性.

关 键 词:乙酰胆碱酯酶  RT-PCR  cDNA克隆  表达

Cloning and expression of acetylcholinesterase in brain of mice
ZHANG Liyuan,LI Na,ZHANG Jianhua,YANG Junzhong,ZHANG Hua,YANG Xueting,YUAN Yongze,LIU Deli. Cloning and expression of acetylcholinesterase in brain of mice[J]. Journal of Central China Normal University(Natural Sciences), 2008, 42(4): 597-601
Authors:ZHANG Liyuan  LI Na  ZHANG Jianhua  YANG Junzhong  ZHANG Hua  YANG Xueting  YUAN Yongze  LIU Deli
Abstract:
Keywords:RT-PCR
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