| 基于CRISPR/Cas9系统构建Slfn2基因敲除的小鼠肺癌细胞系 |
| |
| 作者姓名： | 陈莹 周祖平 邢兵 蒲仕明 |
| |
| 作者单位： | 1. 广西师范大学生命科学学院;2. 广西高校干细胞与医药生物技术重点实验室(广西师范大学);3. 广西师范大学生物医学研究中心 |
| |
| 基金项目： | 国家自然科学基金(81972700,61827819)；;广西自然科学基金(2018GXNSFBA281115)； |
| |
| 摘 要： | ![]()
为构建Slfn2-/-小鼠肺癌细胞系(Lewis lung carcinoma, LLC),本文利用CRISPR/Cas9技术，在CHOPCHOP网站筛选Slfn2基因的sgRNA序列，将合成的oligo序列退火后连接至pLenti CRISPR v2质粒中，并与pMD2.G、psPAX2共转染至293T细胞中包装慢病毒；利用包装的慢病毒感染LLC细胞，经筛选和单克隆培养，获取Slfn2-/-敲除的LLC细胞。结果显示：SgRNA成功插入载体重组质粒；利用3质粒包装的慢病毒成功将LLC中的Slfn2基因突变，获得丢失8个碱基移码突变和丢失180个碱基缺失突变的Slfn2-/-小鼠肺癌细胞。可见，利用CRISPR/Cas9技术成功构建了Slfn2基因敲除的小鼠肺癌细胞。
|
| 关 键 词： | 肺癌 慢病毒 Slfn2 CRISPR/Cas9 |
|
|
