PP2A Cα敲除小鼠心肌细胞模型的构建 |
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引用本文: | 陈文,温明达,董大川,高艳红,张朝.PP2A Cα敲除小鼠心肌细胞模型的构建[J].南京师大学报,2013(2):74-77. |
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作者姓名: | 陈文 温明达 董大川 高艳红 张朝 |
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作者单位: | 南京师范大学生命科学学院江苏省分子医学生物技术重点实验室 |
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基金项目: | 973课题(2006CB943500)子项目;国家自然基金课题(31171302);江苏高校优势学科建设工程项目(164320H106) |
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摘 要: | 体外构建PP2A Cα敲除的原代小鼠心室肌细胞模型.选择性地将雄性PP2A Cαfl/fl,Cre/-小鼠与雌性PP2ACαfl/fl,Cre/-小鼠交配.新生小鼠心脏经胰酶消化后差速贴壁获得原代小鼠心室肌细胞,用带有Cre的腺病毒侵染心肌细胞,经荧光显微镜观察和Western-blot检测,分析PP2A Cα的敲除效果.将基因型为PP2A Cαfl/fl,Cre/-的雌雄小鼠进行交配,得到其同样基因型的后代,进而可获得足量基因型为PP2A Cαfl/fl,Cre/-的原代小鼠心肌细胞.用带有重组酶Cre的腺病毒侵染细胞48 h后,可见带有绿色荧光的心肌细胞;Western-blot检测显示,PP2A Cα在Cre腺病毒侵染的心肌细胞可下调60%~80%.本研究成功建立了PP2A Cα敲除的原代小鼠心肌细胞模型.
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关 键 词: | PP2A Cα 新生小鼠心肌细胞 带重组酶Cre的腺病毒 |
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