Plcd1转基因小鼠的制备 |
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引用本文: | 杨伟伟,殷筱舒,殷黎静,张艳丽,李高天,刘桂杰,俞利平,顾美儿,吴宝金.Plcd1转基因小鼠的制备[J].杭州师范大学学报(自然科学版),2013(1):1-7. |
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作者姓名: | 杨伟伟 殷筱舒 殷黎静 张艳丽 李高天 刘桂杰 俞利平 顾美儿 吴宝金 |
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作者单位: | 杭州师范大学实验动物中心;山东省青岛第十七中学;江苏大学实验动物中心 |
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基金项目: | 国家自然科学基金项目(31071092);浙江省公益性技术应用研究计划项目(2012C37084);浙江省大学生科技创新活动计划(新苗人才计划)2011R421029 |
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摘 要: | 通过制备Plcd1转基因小鼠研究Plcd1基因功能.首先逆转录PCR获得约2.2kb的Plcd1基因全长,T载体克隆后测序验证;以pMD19-T-Plcd1为模板,通过设计引物及PCR扩增引入酶切位点,与pEF6/V5-His同时进行酶切、连接,构建pEF6/V5-His-Plcd1表达载体;经真核表达验证后,酶切获得目标片段,显微注射681枚受精卵,在82只仔鼠中获得转基因阳性首建鼠15只,其中13只稳定遗传并建系.PLCD1-HIS融合蛋白在睾丸组织中表达,在皮肤组织中无表达.Plcd1转基因小鼠为Plcd1功能研究奠定了基础.
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关 键 词: | Plcd1 pEF6/V5-His-Plcd1 显微注射 转基因小鼠 |
Establishment of Plcd1 Transgenic Mice |
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Authors: | YANG Weiwei YIN Xiaoshu YIN Lijing ZHANG Yanli LI Gaotian LIU Guijie YU Liping GU Meier WU Baojin |
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Institution: | 1(1.Laboratory of Experimental Animal Science,Hangzhou Normal University,Hangzhou 310036,China; 2.Qingdao Number 17 Middle School of Shandong Province,Qingdao 266031,China; 3.Laboratory Animal Center,Jiangsu University,Zhenjiang 212013,China) |
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Abstract: | |
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Keywords: | |
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