| 用参数Z表征疏水色谱中脲变α-糜蛋白酶及其折叠中间体的分子构象变化 |
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| 引用本文： | 耿信笃,刘振岭,柯从玉,李建军.用参数Z表征疏水色谱中脲变α-糜蛋白酶及其折叠中间体的分子构象变化[J].西北大学学报,2007,37(6):879-885. |
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| 作者姓名： | 耿信笃 刘振岭 柯从玉 李建军 |
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| 作者单位： | 西北大学现代分离科学研究所/合成与天然功能分子化学教育部重点实验室，西北大学现代分离科学研究所/合成与天然功能分子化学教育部重点实验室，西北大学现代分离科学研究所/合成与天然功能分子化学教育部重点实验室，西北大学现代分离科学研究所/合成与天然功能分子化学教育部重点实验室 陕西西安710069，陕西西安710069，新乡医学院化学教研室，河南新乡453003，陕西西安710069，陕西西安710069 |
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| 摘 要： | 目的用参数Z表征疏水色谱中脲变α-糜蛋白酶(α-Chy)及其折叠中间体的分子构象变化。方法用疏水色谱法对不同脲变条件下的α-Chy进行分离,对收集的不同馏分用基质辅助激光解吸附离子化飞行时间质谱(HPHIC-MALDI-TOF-MS)进行检测,并用紫外和荧光光谱对其分子构象变化进行了验证。结果确认了脲变α-Chy中仅有一个稳定的折叠中间体存在,发现二者的Z值均随脲浓度的增加而减小。在脲浓度范围为0~3.0 mol.L-1时,α-Chy折叠中间体的Z值远小于天然α-Chy的Z值,而脲浓度为4.0 mol.L-1和5.0 mol.L-1时,折叠中间体的Z值稍大于天然α-Chy的Z值。结论α-Chy折叠中间体的分子构象随脲浓度改变基本呈连续性变化,而天然α-Chy的分子构象随脲浓度呈不连续性变化。进一步发现α-Chy的Z值与其复性回收率之间存在着相似的变化规律。中间体的保留机理服从计量置换保留理论(SDT-R),且得到的参数Z可用来表征天然α-Chy和其折叠中间体的分子构象变化。
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| 关 键 词： | 蛋白折叠 分子构象 疏水相互作用色谱 基质辅助激光解吸附离子化飞行时间质谱(MALDI-TOF-MS) 计量置换 α-糜蛋白酶(α-Chy) 折叠中间体 |
| 文章编号： | 1000-274X（2007）06-0879-07 |
| 收稿时间： | 2007-10-29 |
| 修稿时间： | 2007年10月29 |
Characterization of the molecular conformational changes of urea-denatured α-Chymotrypsin and its folded intermediate by parameter Z in high performance hydrophobic interaction chromatography |
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| GENG Xin-du,LIU Zhen-ling,KE Cong-yu,LI Jian-jun.Characterization of the molecular conformational changes of urea-denatured α-Chymotrypsin and its folded intermediate by parameter Z in high performance hydrophobic interaction chromatography[J].Journal of Northwest University(Natural Science Edition),2007,37(6):879-885. |
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| Authors: | GENG Xin-du LIU Zhen-ling KE Cong-yu LI Jian-jun |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | protein folding molecular conformation hydrophobic interaction chromatography matrix-assisted laserdesorption ionization time of flight mass spectrometer stoichimetric displacement a-Chymotrypsin folded intermediate |
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