摘 要: | 大插入片段宏基因组文库的构建是开发大片段目的基因及分析其结构与功能的基础. 文中分别采用十六烷基三甲基溴化铵( CTAB) 法、试剂盒及琼脂糖包埋法提取活性污泥宏基因组DNA,其中琼脂糖包埋法获得的DNA 片段大于23 kbp,利用此DNA 成功构建了以pCC1FOS 为载体的Fosmid 文库,该文库含有5280 个克隆,平均插入片段长度为35 ~40 kbp,共包含约200Mbp 的宏基因组DNA. 从此文库中随机挑选200 个克隆,利用活性筛选方法快速筛选到了1 个含有淀粉酶的阳性克隆,表明活性污泥Fosmid 文库可用于功能基因的活性筛选,具有开发新基因的潜力.
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