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活性污泥宏基因组Fosmid文库的构建
作者姓名:苟敏  曲媛媛  周集体  许炳雯  曹湘禹
作者单位:大连理工大学 工业生态与环境工程教育部重点实验室,辽宁 大连 116024
基金项目:国家自然科学基金资助项目
摘    要:大插入片段宏基因组文库的构建是开发大片段目的基因及分析其结构与功能的基础. 文中分别采用十六烷基三甲基溴化铵( CTAB) 法、试剂盒及琼脂糖包埋法提取活性污泥宏基因组DNA,其中琼脂糖包埋法获得的DNA 片段大于23 kbp,利用此DNA 成功构建了以pCC1FOS 为载体的Fosmid 文库,该文库含有5280 个克隆,平均插入片段长度为35 ~40 kbp,共包含约200Mbp 的宏基因组DNA. 从此文库中随机挑选200 个克隆,利用活性筛选方法快速筛选到了1 个含有淀粉酶的阳性克隆,表明活性污泥Fosmid 文库可用于功能基因的活性筛选,具有开发新基因的潜力.

关 键 词:活性污泥  宏基因组DNA  Fosmid文库  活性筛选  淀粉酶  
收稿时间:2011-08-05
本文献已被 CNKI 万方数据 等数据库收录!
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