一株抗黄芪根腐病芽孢杆菌的筛选、鉴定及抑菌物质的初步研究

从河西走廊敦煌盐碱土中分离筛选出有效拮抗黄芪根腐病病原菌尖孢镰刀菌的细菌,以期能为黄芪根腐病的生物防治提供菌种资源.采用平板对峙法和琼脂扩散法筛选拮抗菌,通过其形态特征、生理生化特征和16S rRNA基因序列进行分类学鉴定;对其产抑菌物质的发酵条件进行优化,探讨其抑菌谱与稳定性;用有机溶剂进行抑菌物质的初步提取和抑菌效果的测定.结果表明,从20株细菌中,初筛获得了抑菌率高于50%的5株细菌,经过复筛得到抑菌圈直径达到3.78 cm的菌株7-2-3-4,其对包括尖孢镰刀菌在内的多种植物病原真菌均有较好的拮抗效果,经鉴定菌株7-2-3-4为枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis),其最优发酵条件为:发酵培养基为LB培养基、装液量100 mL每250 mL、接种量5%、初始pH 7、发酵时间15 h.菌株7-2-3-4在温度-20～121℃、pH 2～12、紫外照射时间0～60 min处理下均表现出较好的稳定性,选择不同的有机溶剂处理无菌发酵液,甲醇粗提物抑菌效果最好,抑菌物质初步鉴定为脂肽类.