| 构建逆转录病毒PBabepuro-Bcl-2表达质粒及稳定转染细胞株 |
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| 引用本文： | 杜星,付旭锋,张志毕,陈贵元,崔清华.构建逆转录病毒PBabepuro-Bcl-2表达质粒及稳定转染细胞株[J].科技信息,2013(23):2-3. |
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| 作者姓名： | 杜星 付旭锋 张志毕 陈贵元 崔清华 |
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| 作者单位： | 云南大学生命科学学院,云南昆明650091 |
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| 基金项目： | 教育部第41批“留学回国人员科研启动基金”项目项目编号2011508; 云南大学学术带头人科研启动基金项目项目编号XT412002; 2012年第五届云南大学研究生科研课题项目研究成果,项目编号ynuy07 |
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| 摘 要： | 目的:构建pBabepuro-Bcl-2逆转录病毒表达质粒,鉴定表达,在小鼠胚胎成纤维细胞NIH3T3中建立过表达Bcl-2稳定转染细胞。方法:以人上皮细胞的cDNA为模板,利用X-tremeGENE HP(Roche)转染293T细胞,蛋白质免疫印迹法在蛋白水平检测表达,利用逆转录病毒感染NIH3T3细胞。结果:成功构建了逆转录病毒表达质粒pBabepuro-BCl-2,蛋白水平检测证实其在293T细胞可以有效地表达,成功建立了过表达Bcl-2的NIH3T3稳定转染细胞。结论:通过构建pBabepuro表达质粒及在NIH3T3建立过表达Bcl-2稳定转染细胞,为进一步研究Bcl-2的功能调控奠定了基础。
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| 关 键 词： | 克隆构建 Bcl-2 逆转录病毒 NIH3T3细胞 |
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