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广西巴马小型猪卵泡抑素(Follistatin)克隆及原核表达
引用本文:郭亚芬,兰干球,莫毅,梁方方,杨秀荣,蒋钦杨,蒋和生,王爱德.广西巴马小型猪卵泡抑素(Follistatin)克隆及原核表达[J].实验动物科学,2007,24(6):26-29,5.
作者姓名:郭亚芬  兰干球  莫毅  梁方方  杨秀荣  蒋钦杨  蒋和生  王爱德
作者单位:1. 广西大学动物科学技术学院,南宁,530004
2. 广西畜牧研究所,南宁,530001
基金项目:国家科技攻关项目;广西科学研究与技术开发计划项目;广西自然科学基金
摘    要:目的通过RT-PCR扩增获得广西巴马小型猪Follistatin的cDNA全序列,经克隆测序分析其cDNA序列结构,进而构建pET-Fo原核表达质粒,使用IPTG诱导表达获得其融合蛋白,为将来进一步研究Follistatin对广西巴马小型猪肌肉生长和繁殖性能的影响奠定基础。方法从广西大学巴马小型猪卵巢中提取总RNA,并以其为模板,应用逆转录-聚合酶链式反应(RT-PCR),在合成的特异性引物引导下,扩增获得广西巴马小型猪卵泡抑素(Follistatin)cDNA的全序列,长度为1 035 bp。将PCR产物克隆到pMD18-T载体后进行序列测定及分析。结果广西巴马小型猪卵泡抑素cDNA序列与GenBank中已报道的家猪卵泡抑素同源性高达99.4%。同时,将目的基因插入到原核表达载体pET 32a 多克隆位点中,构建了Follistatin的原核表达载体,并转化于大肠杆菌BL21。转化菌经异丙基硫代半乳糖苷(IPTG)诱导,变性聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)和蛋白质免疫印迹(Western blotting)分析。结论实验已成功地表达了Follistatin的融合蛋白(约58.4 ku)。

关 键 词:广西巴马小型猪  卵泡抑素  克隆  原核表达
文章编号:1006-6179(2007)06-0026-04
收稿时间:2007-11-12
修稿时间:2007年11月12

Cloning and Prokaryotic Expression of Follistatin Gene from the Guangxi Bama Minipig
GUO Ya-fen,LAN Gan-qiu,MO Yi,LIANG Fang-fang,YANG Xiu-rong,JIANG Qin-yang,JIANG He-sheng,WANG Ai-de.Cloning and Prokaryotic Expression of Follistatin Gene from the Guangxi Bama Minipig[J].Shiyan Dongwu Kexue,2007,24(6):26-29,5.
Authors:GUO Ya-fen  LAN Gan-qiu  MO Yi  LIANG Fang-fang  YANG Xiu-rong  JIANG Qin-yang  JIANG He-sheng  WANG Ai-de
Abstract:
Keywords:Guangxi Bama minipig  Follistatin  Cloning  Prokaryotic expression
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