盐酸戊乙奎醚对大鼠心肌微血管内皮细胞缺氧/复氧后的保护作用

目的：从细胞水平建立大鼠心肌微血管内皮细胞缺氧/复氧模型,观察了盐酸戊乙奎醚对心肌微血管内皮细胞的H/R损伤的保护作用。方法：实验采用酶消化法进行细胞的原代培养,1：2传代。采用荧光标记乙酰化Dil-Ac-LDL的方法鉴定。培养的细胞随机分为4组,①对照组,常氧环境下培养,不给予任何处理;②H/R组,改培养液为D-Hank,s液,于37℃、5%CO2、95%N2 密闭缺氧鑵内培养2h后,弃D-Hank,s液,改为完全培养液,放入常氧培养箱中继续培养4h;③PHC预处理组,在细胞缺氧2h前给予PHC（终浓度为0.1μm•L-1）预处理,④H/R +PHC组,在细胞H/R后,给予PHC（终浓度为0.1μm•L-1）孵育2h。MTT自动比色法测细胞活力,流式细胞法检测细胞凋亡。结果：①成功培养大鼠心肌微血管内皮细胞,用荧光标记乙酰化Dil-Ac-LDL的方法鉴定为微血管内皮细胞。②成功制备出微血管内皮细胞的H/R模型 将试验细胞培养液改为D-Hank,s 液,置于37℃、5%CO2、92%N2 密闭缺氧罐中环缺氧2h,后改为完全培养液放入常氧培养箱中继续培养4h可制备出微血管内皮细胞的I/R模型。③. H/R组细胞死亡率和凋亡率与对照组相比明显增高,差异有统计学意义（P<0.01）,PHC+H/R组的细胞死亡率和凋亡率下降,差异有统计学意义（P<0.05）,H/R+PHC组与对照组相比,虽然细胞的死亡率和凋亡率有所下降,但差异没有统计学意义（P>0.05）。结论：PHC预处理对大鼠微血管内皮细胞的H/RI有保护作用。关键词：盐酸戊乙奎醚;心肌微血管内皮细胞;缺氧/复氧

Effects of penehyclidine hydrochloride on Cardiac microvascular endotheliocyte apoptosis after hypoxia/reoxygenation injury in rats