改造的腺病毒5型E1A基因对TNF-α诱导的猪血管内皮细胞中NF-κB活性的抑制作用 |
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引用本文: | 马业伟,周小山,赵清正,杨军,高新,李艳春,刘玉英,王争.改造的腺病毒5型E1A基因对TNF-α诱导的猪血管内皮细胞中NF-κB活性的抑制作用[J].科学通报,2003,48(1). |
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作者姓名: | 马业伟 周小山 赵清正 杨军 高新 李艳春 刘玉英 王争 |
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作者单位: | 1. 中国协和医科大学,中国医学科学院肿瘤医院肿瘤研究所,北京100021 2. 军事医学科学院野战输血研究所,北京,100850 |
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基金项目: | 首都创新工程项目(248项目) |
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摘 要: | 在延缓性免疫排斥反应(DXR)过程中, NF-κB发挥着关键作用. 如何恰到好处地抑制其活性是本领域研究的重要问题之一. 用改造的E1A基因(E1A)包括功能区(1 ~ 80氨基酸)和核定位区(139 ~ 243氨基酸), 删除其中可能对人体有害的CR2区, 将其克隆到真核表达载体pcDNA3中, 并转染猪血管内皮细胞(PAEC), 经G418筛选, 获得稳定表达细胞株. RT-PCR技术和细胞生长曲线分析, 证明E1AΔ基因能在PAEC中稳定表达, 且不影响细胞的正常生长, 并能抵抗肿瘤坏死因子-α (TNF-α)诱导的细胞凋亡. 报告基因分析表明, E1A(能抑制由TNF-α诱导的NF-κB活性, 其抑制率为53%, 对NF-κB信号转导途径下游的一个重要炎症基因--E-选择素基因的表达抑制率达63%. 综上, E1AΔ基因的这些功能基本符合异种器官移植中克服DXR的要求, 为利用E1AΔ基因克服DXR的可行性提供了实验依据.
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关 键 词: | 延缓性免疫排斥反应 E1AΔ 猪血管内皮细胞 NF-κB E-选择素 |
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