| 溶菌酶触发的芽孢杆菌芽孢萌发及其异质性研究 |
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| 作者姓名： | 王桂文 张鹏飞 王晓春 陈欢君 Peter Setlow LI Yongqing |
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| 作者单位： | 广西科学院, 广西南宁 530007,东卡罗来纳大学物理系, 美国北卡罗来纳州格林维尔市, NC 27858,广西科学院, 广西南宁 530007,广西大学生命科学与技术学院, 广西南宁 530004,康涅狄格大学健康中心分子、微生物与结构生物学系, 美国康涅狄格州法明顿, CT 06030,东卡罗来纳大学物理系, 美国北卡罗来纳州格林维尔市, NC 27858 |
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| 基金项目： | 国家自然科学基金项目(11264004,31460035)资助。 |
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| 摘 要： | 【目的】了解溶菌酶触发芽孢杆菌孢子萌发的异质性及其机制,为认识芽孢(Spore)萌发机制和杀灭芽孢提供参考。【方法】应用拉曼光谱和微分干涉差(DIC)显微镜成像技术高通量分析大量单个Bacillus subtilis(Bs)和B.megaterium(Bm)芽孢经溶菌酶触发的萌发动态。【结果】溶菌酶浓度和温度越高,芽孢萌发越快,孢内CaDPA开始快速释放时间(T_(lag))、快速释放所需时间(ΔT_(release))和芽孢皮层水解所需时间(ΔT_(lys))越短;低于20℃,Bs芽孢萌发的ΔT_(release)值是25℃时的4倍以上。SpoVA蛋白高表达菌株的ΔT_(release)值和普通菌株基本相同,而缺少皮层水解酶的菌株ΔT_(release)值高于普通菌株。95℃处理15min的孢子,其T_(lag)、ΔT_(release)和ΔT_(lys)值是对照的2倍以上。Bs芽孢萌发的异质性明显,不仅表现在芽孢间,也表现在菌株间。Bm芽孢对溶菌酶更敏感,芽孢间的异质性显著低于Bs。【结论】溶菌酶触发的芽孢萌发在物种、菌株和单细胞层面都存在显著的异质性;溶菌酶浓度和温度对芽孢萌发有重大影响;皮层水解酶也可能参与溶菌酶触发的芽孢萌发进程。
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| 关 键 词： | 拉曼光谱 微分干涉差成像 芽孢杆菌 芽孢萌发 溶菌酶 单细胞分析 |
| 收稿时间： | 2016-02-19 |
| 修稿时间： | 2016-04-01 |
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