肝片吸虫抗原基因的克隆与筛选 |
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作者姓名: | 张西玉 徐恒 吴峰 郑莉 |
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作者单位: | 乐山师范高等专科学校,乐山614004;四川大学生命科学学院,成都610064 |
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基金项目: | 国家自然科学基金(39580017) |
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摘 要: | 提取肝片吸虫总RNA,经oligo(dT)-纤维素柱分离得到mRNA,反转录合成cDNA后,连接Eco RI人工合成接头,酶切后克隆到表达型质粒载体pGEX-1λT,转化大肠杆菌JM107菌株构建肝片吸虫cDNA文库(文库大小约为2.1×105).用免疫印迹筛选出5个阳性克隆,分别命名为pFH2,pFH4,pFH16,pFH21和pFH29.其中pFH21印迹信号最强.Eco RI酶切pFH21显示插入片段大小约为1.0kb.重组子pFH21经SDS-PAGE电泳显示表达有一个重组蛋白,分子量约为48kD.
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关 键 词: | 肝片吸虫 抗原基因 克隆 |
文章编号: | 0490-6756(2000)02-0247-05 |
修稿时间: | 1999-10-12 |
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