| 志贺氏菌实时荧光单引物等温扩增方法的建立及应用 |
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| 引用本文： | 王建昌,胡连霞,段永生,李 静,王金凤.志贺氏菌实时荧光单引物等温扩增方法的建立及应用[J].北京工商大学学报(自然科学版),2015,33(6):40-45. |
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| 作者姓名： | 王建昌 胡连霞 段永生 李 静 王金凤 |
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| 作者单位： | 河北出入境检验检疫局 检验检疫技术中心, 河北 石家庄 050051,河北出入境检验检疫局 检验检疫技术中心, 河北 石家庄 050051,河北出入境检验检疫局 检验检疫技术中心, 河北 石家庄 050051,河北出入境检验检疫局 检验检疫技术中心, 河北 石家庄 050051,河北出入境检验检疫局 检验检疫技术中心, 河北 石家庄 050051 |
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| 基金项目： | 质检公益性科研专项项目(201210128；201310126)。 |
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| 摘 要： | 以志贺氏菌ipaH基因特异序列为靶序列,设计RNA-DNA组合引物和链终止序列,优化反应体系,建立实时荧光单引物等温扩增检测志贺氏菌的方法,反应时间为44min。通过对4株不同群志贺氏菌和12株其他食源性致病菌进行实时荧光单引物等温扩增检测,结果表明,除4株志贺氏菌外,其他细菌均未扩增出荧光曲线。进一步研究表明,采用普通热裂解法提取DNA,实时荧光检测福氏志贺氏菌DNA的灵敏度为1.16fg/μL,纯培养菌液的灵敏度为1.3CFU/mL；对牛奶模拟样品中福氏志贺氏菌的检出限是1.8CFU/mL。研究结果表明,实时荧光单引物等温扩增检测志贺氏菌灵敏度高、特异性强、耗时短、方法简便。
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| 关 键 词： | 实时荧光单引物等温扩增 志贺氏菌 ipaH基因 |
| 收稿时间： | 2015/3/4 0:00:00 |
Establishment and Application of Real-time Fluorescence Single Primer Isothermal Amplification for Shigella |
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| Institution: | Technical Center of Inspection and Quarantine, Hebei Entry-Exit Inspection and Quarantine Bureau, Shijiazhuang 050051, China,Technical Center of Inspection and Quarantine, Hebei Entry-Exit Inspection and Quarantine Bureau, Shijiazhuang 050051, China,Technical Center of Inspection and Quarantine, Hebei Entry-Exit Inspection and Quarantine Bureau, Shijiazhuang 050051, China,Technical Center of Inspection and Quarantine, Hebei Entry-Exit Inspection and Quarantine Bureau, Shijiazhuang 050051, China and Technical Center of Inspection and Quarantine, Hebei Entry-Exit Inspection and Quarantine Bureau, Shijiazhuang 050051, China |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | real-time fluorescence single primer isothermal amplification Shigella ipaH gene |
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