导向溶栓分子scFv—UK32中连接钛的引入和在昆虫细胞中的表达

为了提高重组导向溶栓分子scFv-UK32的溶纤活性，通过重组PCR方法在编码scFv与UK32的碱基之间引入编码KLGGGG连接肽的碱基序列，并克隆到转移载体pBacPAK9上，通过与线性病毒DNA BacPAK6/Bsu361 digest共转染到昆虫细胞Sf 9内，进行表达。表达产物分泌到上清中，共转染后第5d（天）用纤维平板法测得Sf 9细胞上清溶纤活性达到107IU/mL，比未引入连接肽的scFv-UK32的表达活性（25IU/mL）高。，ELISA实验表明共转染上清具有明显对活化血小板特异结合能力，Western Blotting实验表明共转染上清可与Pro-UK的单抗特异结合。