Northern杂交法分析转染的胞苷酶 |
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引用本文: | 傅桂莲,王琰,张小刚,德伟林.Northern杂交法分析转染的胞苷酶[J].北华大学学报(自然科学版),1998(2). |
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作者姓名: | 傅桂莲 王琰 张小刚 德伟林 |
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作者单位: | 吉林医学院临床生化教研室!吉林132001(傅桂莲,王琰,张小刚),吉铁中心医院检验科(德伟林) |
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摘 要: | 目的:研究人胞苷转移酶(CitidyltransferaseCT)cDNA在鼠巨噬细胞中的表达。方法:按照T.Mainiatis等人1]的方法从转染的巨噬细胞中提取总RNA,电泳分离RNA,转移BNA至尼龙膜并固定,制备32p标记的胞苷转移酶DNA探针,杂文及放射性自显影。结果:对照组无表达,同类转染的细胞均有不同程度的表达。结论:制备探针前应用电泳法确定CTcDNA片段的浓度比紫外光吸收法更准确适用。Quickspin柱(SephedexG-25)用于回收标记的探针,有利于提高探针的纯度,增加杂交的灵敏度。
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关 键 词: | 胞苷转移酶 探针 放射自显影 |
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