| 产普鲁兰降解酶菌株的分离筛选及酶学特性的研究 |
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| 引用本文： | 王儒恺,冯碧薇,范洁琼,周峻岗,吕红.产普鲁兰降解酶菌株的分离筛选及酶学特性的研究[J].复旦学报(自然科学版),2012,51(3):290-299. |
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| 作者姓名： | 王儒恺 冯碧薇 范洁琼 周峻岗 吕红 |
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| 作者单位： | 复旦大学生命科学学院遗传工程国家重点实验室,上海,200433 |
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| 基金项目： | 国家高技术研究发展计划(863计划)资助项目 |
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| 摘 要： | 普鲁兰降解酶(pullulan degrading enzymes)能够专一水解普鲁兰多糖α-1,6-糖苷键以及特定位置的α-1,4-糖苷键,在工业、食品业、医疗保健等行业中具有重要的应用意义.本研究采用唯一碳源法从稻田土样中培养筛选到21株产普鲁兰降解酶的菌株.对菌株A1的鉴定及其产生的普鲁兰降解酶的分析表明,该菌株为气单胞菌属,其产生的酶属于Ⅰ型普鲁兰酶(Type I pullulanase,EC 3.2.1.41),专一水解普鲁兰多糖α-1,6-糖苷键.该酶的最适反应温度为60℃,最适反应pH为6.0,具有良好的温度稳定性和适应性;同时在pH为4.0时仍然保留50%的酶活.进一步对A1菌株产酶的发酵条件(pH、温度、时间)进行了优化,摇瓶中A1分泌表达Ⅰ型普鲁兰酶的水平达到21.2 U/mL.根据已报道的气单胞菌属普鲁兰酶基因的保守序列设计引物,克隆获得了4 053 bp的A1普鲁兰酶基因pluA1全长序列,编码1351个氨基酸.本研究结果为该酶的开发应用奠定了基础.
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| 关 键 词： | 气单胞菌 普鲁兰降解酶 Ⅰ型普鲁兰酶 酶学性质 |
Screening and Identification of Pulllulanase-producing Strain and Its Enzymatic Characteristics |
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| Institution: | WANG Ru-kai,FENG Bi-wei,FAN Jie-qiong,ZHOU Jun-gang,Lü Hong(State Key Laboratory of Genetic Engineering,Institute of Genetics,School of Life Sciences, Fudan University,Shanghai 200433,China) |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | Aeromonas sp pullulan degrading enzymes type I pullulanase enzymatic characteristics |
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