| 寡核苷酸芯片制备及其杂交条件的优化 |
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| 引用本文： | 鲁艳芹,韩金祥,陈士俊,黄海燕.寡核苷酸芯片制备及其杂交条件的优化[J].山东大学学报(理学版),2004,39(3):92-96. |
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| 作者姓名： | 鲁艳芹 韩金祥 陈士俊 黄海燕 |
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| 作者单位： | 1. 山东省医药生物技术研究中心,国家卫生部生物技术药物重点实验室,山东,济南,250062
2. 山东省济南市传染病医院,山东,济南,250062 |
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| 基金项目： | 山东省科技厅重点攻关项目基金资助(003100104) |
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| 摘 要： | 探讨了2种不同硅烷化试剂3-氨基丙基三甲氧基硅烷、三甲氧基丙基二乙烯基三胺及其不同处理时间对寡核苷酸探针固定效率的影响.结果表明3％的3-氨基丙基三甲氧基硅烷的95％丙酮溶液处理2h,然后用5％戊二醛溶液处理1 h,可以获得很好的杂交信号.对比polyT15空间子,含有相同寡核苷酸序列的PEG6、PEG12空间子能使杂交信号增强6、8倍.在以pH值9-11的碳酸盐缓冲液为点样液时,杂交信号随着pH值的逐渐升高而略有下降.寡核苷酸探针的浓度和荧光标记样品的浓度影响杂交结果,当寡核苷酸探针的浓度为25μmol、所用长度为110bp的荧光标记的PCR产物为2μL,经杂交液6×SSEPT稀释至10μL时,可以获得很好的杂交信号.
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| 关 键 词： | 硅烷化 空间子 寡核苷酸探针 杂交 |
| 文章编号： | 1671-9352(2004)03-0092-05 |
| 修稿时间： | 2003年9月8日 |
Optimization of preparation for oligonucleotide array and hybridization |
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| LU Yan-qin,HAN Jin-xiang,CHEN Shi-jun & HUANG Hai-yan.Optimization of preparation for oligonucleotide array and hybridization[J].Journal of Shandong University,2004,39(3):92-96. |
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| Authors: | LU Yan-qin HAN Jin-xiang CHEN Shi-jun & HUANG Hai-yan |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | Silanization Spacer Oligonucleotide probe Hybridization |
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