PMA-qPCR快速检测结核活菌方法的建立 |
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引用本文: | 温书香,王慧勤,曹旭东,赵新霞,李亚,张亚丽,陈鹏博,纪太旺,陈创夫,袁莉.PMA-qPCR快速检测结核活菌方法的建立[J].石河子大学学报,2014(2):143-147. |
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作者姓名: | 温书香 王慧勤 曹旭东 赵新霞 李亚 张亚丽 陈鹏博 纪太旺 陈创夫 袁莉 |
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摘 要: | 为建立快速鉴别诊断结核活/死菌的方法,本研究应用PMA染料与实时定量PCR技术结合(PMA-qPCR),以结核标准株16 sRNA基因为靶基因,PMA对样品基因组提取物进行处理,PMA能够与死细胞DNA分子共价交联并抑制DNA分子扩增。结果显示:PMA浓度在3μg/mL,曝光时间大于15 min时,PMA既不影响活菌的的扩增,又能有效抑制死菌的扩增;当PMA浓度大于20μg/mL时,PMA影响活菌DNA的扩增;PMA-qPCR技术能够定量不同比例的结核活/死菌悬液中的活菌。结论:PMA-qPCR技术能够快速准确检测出结核杆菌中的活细胞。
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