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甲基化CpG结合结构域蛋白的原核表达及应用
引用本文:刘涛,兰洋,吴传芳.甲基化CpG结合结构域蛋白的原核表达及应用[J].四川大学学报(自然科学版),2014,51(2):408-412.
作者姓名:刘涛  兰洋  吴传芳
作者单位:四川大学生命科学学院;四川大学生命科学学院;四川大学生命科学学院
基金项目:国家自然科学基金项目(30970625)
摘    要:本文构建了甲基化CpG结合结构域(MBD)蛋白的原核表达质粒,并表达了GSTMBD融合蛋白,采用GST柱对该融合蛋白进行纯化.体外pull-down实验发现,GST-MBD融合蛋白能够与小鼠胚胎成纤维细胞MEF中oct4基因的启动子DNA结合,验证了该蛋白的体外生物活性.利用相同的实验方法,发现GST-MBD融合蛋白能够与MEF细胞中inhbb基因的启动子区结合,而不能与小鼠胚胎干细胞R1中的inhbb基因的启动子区DNA结合,同时采用半定量PCR方法检测到inhbb基因在R1细胞中高表达,而在MEF细胞中不表达,表明inhbb基因受到DNA甲基化的调控.

关 键 词:表观遗传学  甲基化CpG结合蛋白  Pull-down
收稿时间:2013/3/14 0:00:00
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