甲基化CpG结合结构域蛋白的原核表达及应用 |
| |
引用本文: | 刘涛,兰洋,吴传芳.甲基化CpG结合结构域蛋白的原核表达及应用[J].四川大学学报(自然科学版),2014,51(2):408-412. |
| |
作者姓名: | 刘涛 兰洋 吴传芳 |
| |
作者单位: | 四川大学生命科学学院;四川大学生命科学学院;四川大学生命科学学院 |
| |
基金项目: | 国家自然科学基金项目(30970625) |
| |
摘 要: | 本文构建了甲基化CpG结合结构域(MBD)蛋白的原核表达质粒,并表达了GSTMBD融合蛋白,采用GST柱对该融合蛋白进行纯化.体外pull-down实验发现,GST-MBD融合蛋白能够与小鼠胚胎成纤维细胞MEF中oct4基因的启动子DNA结合,验证了该蛋白的体外生物活性.利用相同的实验方法,发现GST-MBD融合蛋白能够与MEF细胞中inhbb基因的启动子区结合,而不能与小鼠胚胎干细胞R1中的inhbb基因的启动子区DNA结合,同时采用半定量PCR方法检测到inhbb基因在R1细胞中高表达,而在MEF细胞中不表达,表明inhbb基因受到DNA甲基化的调控.
|
关 键 词: | 表观遗传学 甲基化CpG结合蛋白 Pull-down |
收稿时间: | 2013/3/14 0:00:00 |
本文献已被 CNKI 等数据库收录! |
| 点击此处可从《四川大学学报(自然科学版)》浏览原始摘要信息 |
| 点击此处可从《四川大学学报(自然科学版)》下载免费的PDF全文 |
|