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枯草杆菌6-磷酸葡萄糖酸脱氢酶的分离纯化及部分性质研究
引用本文:秦岭,刘克武,莫宏春,江琰,国锦林,刘祝君,喻东. 枯草杆菌6-磷酸葡萄糖酸脱氢酶的分离纯化及部分性质研究[J]. 四川大学学报(自然科学版), 2003, 40(5): 939-944
作者姓名:秦岭  刘克武  莫宏春  江琰  国锦林  刘祝君  喻东
作者单位:四川大学生命科学学院,成都,610064;四川大学生命科学学院,成都,610064;四川大学生命科学学院,成都,610064;四川大学生命科学学院,成都,610064;四川大学生命科学学院,成都,610064;四川大学生命科学学院,成都,610064;四川大学生命科学学院,成都,610064
摘    要:采用DEAE—Sephaurose离子交换层析,Blue-Seplaarose CL-6B特异结合层析和Sephadex G-200凝胶过滤技术,对枯草芽孢杆菌中的6-磷酸葡萄糖酸脱氢酶进行了分离纯化,纯化倍数为112.3倍,比活为1.46U/mg,回收率为8.2%,纯化酶液经聚丙烯酰胺凝胶电泳检验为单一带,测得全酶相对分子质量为107kD,具有两个分子量相同的亚基,亚基相对分子质量为51kD,最适pH值为8.0,最适温度为30℃,对热不稳定,以6-磷酸葡萄糖酸和NADP^ 为底物,其Km值分别为Km1(NADP^ )=19.8μmol/L和Km2(6-GPA)=22.6μmol/L,在5mmol/L~50mmol/L浓度范围内,Mg^ ,Ca^2 和Mn^2 对酶有激活作用,Fe^3 和Cu^2 对酶有抑制作用,K^ ,Na^ ,Cl^-,NO^-3,SO^-4对酶几乎没有影响,用PMSF,TNBS,NBS,DTT和BrAc对酶进行修饰,实验结果表明,丝氨酸、苏氨酸、赖氨酸和组氨酸残基可能是该酶活性中心的功能基团。

关 键 词:枯草芽孢杆菌  6-磷酸葡萄糖酸脱氢酶  分离纯化  性质
文章编号:0490-6756(2003)05-0939-06

Isolation and Studing Some Properties of 6-Phosphogluconate Dehydrogenase From Bacilllus Subtilis
Abstract:
Keywords:Bacillus subtilis  6-phosphogluconate dehydrogenase  purification  properties  
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