枯草杆菌6-磷酸葡萄糖酸脱氢酶的分离纯化及部分性质研究 |
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引用本文: | 秦岭,刘克武,莫宏春,江琰,国锦林,刘祝君,喻东. 枯草杆菌6-磷酸葡萄糖酸脱氢酶的分离纯化及部分性质研究[J]. 四川大学学报(自然科学版), 2003, 40(5): 939-944 |
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作者姓名: | 秦岭 刘克武 莫宏春 江琰 国锦林 刘祝君 喻东 |
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作者单位: | 四川大学生命科学学院,成都,610064;四川大学生命科学学院,成都,610064;四川大学生命科学学院,成都,610064;四川大学生命科学学院,成都,610064;四川大学生命科学学院,成都,610064;四川大学生命科学学院,成都,610064;四川大学生命科学学院,成都,610064 |
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摘 要: | 采用DEAE—Sephaurose离子交换层析,Blue-Seplaarose CL-6B特异结合层析和Sephadex G-200凝胶过滤技术,对枯草芽孢杆菌中的6-磷酸葡萄糖酸脱氢酶进行了分离纯化,纯化倍数为112.3倍,比活为1.46U/mg,回收率为8.2%,纯化酶液经聚丙烯酰胺凝胶电泳检验为单一带,测得全酶相对分子质量为107kD,具有两个分子量相同的亚基,亚基相对分子质量为51kD,最适pH值为8.0,最适温度为30℃,对热不稳定,以6-磷酸葡萄糖酸和NADP^ 为底物,其Km值分别为Km1(NADP^ )=19.8μmol/L和Km2(6-GPA)=22.6μmol/L,在5mmol/L~50mmol/L浓度范围内,Mg^ ,Ca^2 和Mn^2 对酶有激活作用,Fe^3 和Cu^2 对酶有抑制作用,K^ ,Na^ ,Cl^-,NO^-3,SO^-4对酶几乎没有影响,用PMSF,TNBS,NBS,DTT和BrAc对酶进行修饰,实验结果表明,丝氨酸、苏氨酸、赖氨酸和组氨酸残基可能是该酶活性中心的功能基团。
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关 键 词: | 枯草芽孢杆菌 6-磷酸葡萄糖酸脱氢酶 分离纯化 性质 |
文章编号: | 0490-6756(2003)05-0939-06 |
Isolation and Studing Some Properties of 6-Phosphogluconate Dehydrogenase From Bacilllus Subtilis |
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Abstract: | |
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Keywords: | Bacillus subtilis 6-phosphogluconate dehydrogenase purification properties |
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