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小麦内质网氧化还原酶在毕赤酵母中的表达
引用本文:胡松青,李旺,陈煜,侯轶.小麦内质网氧化还原酶在毕赤酵母中的表达[J].华南理工大学学报(自然科学版),2019,47(8).
作者姓名:胡松青  李旺  陈煜  侯轶
作者单位:华南理工大学食品科学与工程学院,广东广州,510640;广东省食品工业研究所有限公司,广东广州,510308;华南理工大学轻工科学与工程学院,广东广州,510640
基金项目:国家自然科学基金;国家自然科学基金
摘    要:为开发健康天然的新型酶制剂型面粉改良剂,利用毕赤酵母重组表达了小麦内质网氧化还原酶1(wEro1);将wero1基因亚克隆至毕赤酵母表达载体pPICZα A,实现了wEro1在毕赤酵母(Pichia pastoris)GS115中的分泌表达,优化诱导表达条件后wEro1的产量可达(53.24±2.11) U/mL;应用硫酸铵沉淀和阴离子交换层析纯化了wEro1,对电泳纯wEro1进行酶学性质研究.结果表明:wEro1具有催化二硫键异构酶(PDI)的巯基氧化活性,且最适pH为7.5,最适温度为30℃;在低温和中性pH条件下,该酶具有较好的稳定性.将毕赤酵母重组wEro1添加到面粉中,考察其对面粉加工品质的影响,发现毕赤酵母重组wEro1改善面粉粉质特性的能力比大肠杆菌重组wEro1更强.

关 键 词:小麦内质网氧化还原酶1  重组蛋白  巯基氧化  面粉粉质
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