| 基于接近效应聚合反应与核酸适体的蛋白质检测新方法 |
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| 引用本文： | 羊小海,王蕾,王柯敏,谭蔚泓,唐红星,孟祥贤,郭秋平.基于接近效应聚合反应与核酸适体的蛋白质检测新方法[J].科学通报,2007,52(20):2363-2366. |
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| 作者姓名： | 羊小海 王蕾 王柯敏 谭蔚泓 唐红星 孟祥贤 郭秋平 |
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| 作者单位： | 1. 湖南大学,化学生物传感与计量学国家重点实验室,长沙410082;湖南大学,生物医学工程中心,长沙410082;湖南大学,化学化工学院,长沙410082;湖南大学,生物纳米与分子工程湖南省重点实验室,长沙410082
2. 湖南大学,化学生物传感与计量学国家重点实验室,长沙410082;湖南大学,生物医学工程中心,长沙410082;湖南大学,生物纳米与分子工程湖南省重点实验室,长沙410082
3. 湖南大学,化学生物传感与计量学国家重点实验室,长沙410082;化学化工学院,长沙410082;湖南大学,生物纳米与分子工程湖南省重点实验室,长沙410082 |
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| 基金项目： | 国家重点基础研究发展计划（批准号：2002CB513110）、国家科技攻关计划（批准号：2003BA310A16,2005EP090026）、科技部国际合作重点项目（批准号：2003DF000039）、国家自然科学基金（批准号：90606003,20475015,20620120107）资助 |
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| 摘 要： | 以核酸适体作为识别分子, 建立了一种简单、灵敏特异的蛋白质检测新方法. 该方法以凝血酶为目标蛋白, 针对其两个结合位点, 分别设计了两条具有3′末端互补碱基序列的核酸适体探针. 当两条探针同时与凝血酶结合时, 末端借助接近效应形成稳定的杂交并在聚合酶的作用下发生聚合反应, 双链DNA产物的量通过Sybr GreenⅠ的荧光信号指示出来. 实验结果表明, 聚合反应初速度与凝血酶的浓度正相关. 本方法中核酸适体探针设计简单灵活, 对目标蛋白选择性和灵敏度高, 检测下限可达到6.9 pmol/L.
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| 关 键 词： | 核酸适体 凝血酶 聚合反应 蛋白质检测 |
| 收稿时间： | 2007-05-29 |
| 修稿时间： | 2007-05-29 |
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