| 两种尿激酶原变体(Ala175→Ser,Tyr187→His,Lys300→His和Ala175→Ser,Tyr187→His)的构建及性质研究 |
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| 作者姓名： | 史蔚 朱慧 薛宇鸣 唐堂 马忠 |
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| 作者单位： | 南京大学生物化学系南京大学医药生物技术国家重点实验室!江苏南京，210093，南京大学生物化学南京大学医药生物技术国家重点实验室!江苏南京，210093，南京大学生物化学系南京大学医药生物技术国家重点实验室!江苏南京，210093，南京大学生物化学系南京大学医药生物技术国家重点实验 |
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| 基金项目： | 国家“8 6 3”高技术研究发展计划资助项目!(No :10 2 - 0 8- 0 2 - 0 1) |
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| 摘 要： | 利用定点突变方法 ,构建了尿激酶原变体基因muk1(Ala175→Ser,Tyr187→His ,Lys30 0→His)及muk2 (Ala175→Ser ,Tyr187→His) .两种尿激酶原变体在大肠杆菌BL2 1中表达得到包涵体 ,经体外变复性 ,SP Sepharose离子交换柱层析 ,Benzamidine Sepharose吸附除去双链尿激酶 ,得到的蛋白均为银染一条带 .用人工合成的发色底物S2 4 4 4测量muk1、muk2的动力学性质 ,muk1的内在酶活性比野生型 pro UK降低 8倍 ,muk2的内在酶活性比野生型 pro UK降低 2 .5倍 ;它们经纤溶酶 (plasmin)激活后的双链活性与 pro UK相比分别为muk1提高 50 % ,muk2和pro UK相当 .在实验基础上讨论了 pro UK高内源性催化活性的机制及其结构基础 .
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| 关 键 词： | 尿激酶原 定点突变 内在酶活性 |
| 本文献已被 CNKI 万方数据 等数据库收录！ |
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