| 利用Gateway技术构建天山雪莲cDNA表达文库 |
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| 引用本文： | 李晨,沈海涛,张煜星,王爱英,祝建波.利用Gateway技术构建天山雪莲cDNA表达文库[J].石河子大学学报,2010,28(5). |
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| 作者姓名： | 李晨 沈海涛 张煜星 王爱英 祝建波 |
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| 作者单位： | 石河子大学生命科学学院农业生物技术重点实验室,石河子,832003 |
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| 基金项目： | 国家高技术研究发展计划(863计划)重点项目，国家自然科学基金项目，新疆兵团科技攻关项目 |
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| 摘 要： | 以天山雪莲为材料,利用gateway技术构建天山雪莲cDNA表达文库。从经低温处理后的天山雪莲叶片中提取并分离mRNA,合成双链cDNA;cDNA经BP重组反应重组到入门载体pDONR222上,构建得到天山雪莲en-try cDNA文库;天山雪莲entry cDNA再经LR重组反应将雪莲cDNA重组到植物表达载体pLEELA上,从而构建了天山雪莲cDNA表达文库。结果表明:cDNA入门文库滴度达到1.2×107cfu/mL,文库总容量为4.8×107cfu。表达文库的滴度为6.9×106cfu/mL,文库总容量为2.76×107cfu,插入片段平均大小1000 bp。阳性克隆率100%。天山雪莲cDNA表达文库的建立为进一步高通量筛选天山雪莲抗寒基因奠定了基础。
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| 关 键 词： | 天山雪莲 cDNA入门文库 cDNA表达文库 gateway技术 |
Construction of A cDNA Library of Saussurea involucrata Kar.et Kir Using Gateway Technology |
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| LI Chen,SHEN Haitao,ZHANG Yanxing,WANG Aiying,ZHU Jianbo.Construction of A cDNA Library of Saussurea involucrata Kar.et Kir Using Gateway Technology[J].Journal of Shihezi University(Natural Science),2010,28(5). |
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| Authors: | LI Chen SHEN Haitao ZHANG Yanxing WANG Aiying ZHU Jianbo |
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