| P15INK4b/MTS2对人肝癌细胞增殖的影响及其机理的初步分析 |
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| 引用本文： | 张弘,柳惠图石法武.P15INK4b/MTS2对人肝癌细胞增殖的影响及其机理的初步分析[J].科学通报,2000,45(5):521-525. |
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| 作者姓名： | 张弘 柳惠图石法武 |
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| 作者单位： | 1北京师范大学生命科学学院 北京100875
2中国医学科学院信息研究所调研室,北京100020
3解放军总医院分子生物学室 北京 100850 |
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| 摘 要： | 利用自行构建的稳定高表达P15INK4B 的人肝癌细胞, 研究了抑癌基因P15 在细胞增殖中的作用. 首先将抑癌基因P15 的cDNA 构建到高效真核表达的质粒载体pXJ41-neo 中的EcoR / Xho 位点, 构建成P15 真核表达质粒pXJP15. 通过脂质体法将pXJP15 质粒转染人肝癌细胞 SMMC-7721, 进一步用G-418 筛选, 获得了稳定高表达P15 的人肝癌细胞模型SHT 及相应的表达空载体的对照细胞模型SVXJ. 通过Northern, Western 分子杂交分析, 表明SHT 细胞中P15 基因表达和蛋白水平都明显高于对照组细胞, 证实成功地建立了P15 高表达的人肝癌细胞模型. 与对照组相比, P15 高表达的SHT1 细胞的增殖受到抑制, 流式细胞光度术和MI 值测定表明P15 阻抑细胞由G1 期向S 期和由G2 期向M 期的转换. Western 免疫印迹分析结果表明, 癌基因c-myc, c-fos 的蛋白水平表达下降可能是P15 抑制细胞增殖的分子机理之一.
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| 关 键 词： | CKIP15 人肝癌细胞 细胞周期 癌基因 |
| 收稿时间： | 1999-09-10 |
| 修稿时间： | 1999-12-13 |
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