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虹鳟鱼(Oncorhynchus mykiss)组蛋白H3启动子的分子克隆及在稀有
引用本文:茅卫锋  汪亚平  孙永华,吴刚  陈尚萍  朱作言.虹鳟鱼(Oncorhynchus mykiss)组蛋白H3启动子的分子克隆及在稀有[J].自然科学进展,2004,14(1):46-50.
作者姓名:茅卫锋  汪亚平  孙永华  吴刚  陈尚萍  朱作言
作者单位:茅卫锋(中国科学院水生生物研究所淡水生态与生物技术国家重点实验室,武汉,430072)       汪亚平(中国科学院水生生物研究所淡水生态与生物技术国家重点实验室,武汉,430072)       孙永华(中国科学院水生生物研究所淡水生态与生物技术国家重点实验室,武汉,430072)       吴刚(中国科学院水生生物研究所淡水生态与生物技术国家重点实验室,武汉,430072)       陈尚萍(中国科学院水生生物研究所淡水生态与生物技术国家重点实验室,武汉,430072)       朱作言(中国科学院水生生物研究所淡水生态与生物技术国家重点实验室,武汉,430072)
基金项目:国家重点基础研究发展规划资助项目(批准号:G2000013109)
摘    要:使用高保真PCR方法从虹鳟鱼基因组中克隆得到虹鳟鱼组蛋白H3启动子.将虹鳟鱼组蛋白H3启动子插入启动子缺失的增强绿色荧光蛋白(EGFP)表达载体pEGFP-1中,构建成重组载体pRH3EGFP-1.通过显微注射法得到转pRH3EGFP-1稀有鮈鲫.在荧光解剖镜下,可以清楚地观察到EGFP在发育到原肠胚的转pRH3EGFP-1稀有鮈鲫中表达.在稀有鮈鲫幼体鱼苗中也可以清楚地观察到EGFP在多个组织中的泛组织表达.比较CMV启动子、鲤鱼β-actin启动子、虹鳟鱼组蛋白H3启动子的EGFP表达载体pCMVEGFP,pCAEGFP,pRH3EGFP-1在稀有鮈鲫胚胎中的表达特性,结果表明pCMVEGFP最早表达,其后为pRH3EGFP-1和pCAEGFP,表达的强度依次为pCMVEGFP>pCAEGFP>pRH3EGFP-1.这说明虹鳟鱼组蛋白H3启动子可以作为一种有效的启动子,应用于鲤科鱼类(如稀有鮈鲫)的转基因研究.

关 键 词:增强绿色荧光蛋白(EGFP)  组蛋白H3启动子  转基因鱼  稀有鮈鲫
修稿时间:2003年4月24日
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