| 靶向HIV-1细胞受体基因CCR5的人工miRNA的构建与鉴定 |
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| 引用本文： | 王颖彬,程通,魏丽华,张涛,梁露萍,夏宁邵.靶向HIV-1细胞受体基因CCR5的人工miRNA的构建与鉴定[J].厦门大学学报(自然科学版),2010,49(3). |
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| 作者姓名： | 王颖彬 程通 魏丽华 张涛 梁露萍 夏宁邵 |
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| 作者单位： | 厦门大学,生命科学学院,国家传染病诊断试剂与疫苗工程技术研究中心,福建,厦门,361005 |
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| 基金项目： | "艾滋病和病毒性肝炎等重大传染病防治"科技重大专项项目，教育部科学技术研究重大项目培育基金，福建省自然科学基金，福建省科技重大专项 |
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| 摘 要： | 趋化因子CCR5是HIV-1入侵机体细胞的主要辅助受体之一,通过抑制CCR5的表达可以在一定程度上阻断HIV-1的复制进程.miRNA介导的RNA干扰相比经典的siRNA在应用中具有更多的特点.本研究的目的是构建可特异有效靶向CCR5的人工miRNA元件.本研究以CCR5基因序列为模板设计了14个miRNA靶序列,以天然miR-30a为基础骨架通过靶序列区替换构建人工miRNA元件.通过将miRNA表达质粒与携带靶序列区的报告质粒的共转染抑制实验检测不同miRNA的抑制效率,结果显示miCCR-13A具有较好的抑制效率和特异性.进一步将miCCR-13A表达载体转染CCR5阳性的HIV-1受体细胞株TZM-b1,RT-PCR检测显示miCCR-13A可在细胞中获得有效表达,同时应用免疫流式细胞术检测显示在miCCR-13A转染细胞相比对照细胞的CCR5蛋白的检测活性明显降低.进一步的研究显示miCCR-13A在细胞中不会影响细胞活性和干扰素效应相关基因osa1和stat1 mRNA水平,具有良好的特异性.本研究获得的可特异靶向CCR5的人工miRNA元件可为进一步的抗HIV-1研究提供重要基础.
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| 关 键 词： | RNA干扰 人工miRNA |
Construction and Identification of Artificial miRNA Targeting to HIV-1 Cell Receptor Gene CCR5 |
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| WANG Ying-bin,CHENG Tong,WEI Li-hua,ZHANG Tao,LIANG Lu-ping,XIA Ning-shao.Construction and Identification of Artificial miRNA Targeting to HIV-1 Cell Receptor Gene CCR5[J].Journal of Xiamen University(Natural Science),2010,49(3). |
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| Authors: | WANG Ying-bin CHENG Tong WEI Li-hua ZHANG Tao LIANG Lu-ping XIA Ning-shao |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | CCR5 |
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