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反义Ki-67和Bc1-2真核细胞双表达载体的构建及鉴定
引用本文:卢天龙,陈建国,韩跃武,张庆华.反义Ki-67和Bc1-2真核细胞双表达载体的构建及鉴定[J].世界科技研究与发展,2008,30(2):202-204.
作者姓名:卢天龙  陈建国  韩跃武  张庆华
作者单位:兰州大学基础医学院医学生物化学与分子生物学研究所,兰州,730000
摘    要:目的 构建反义Ki-67和Bc1-2双表达栽体用于肿瘤基因治疗的研究.方法 从SGC-7901细胞总RNA中逆转录扩增Ki-67和Bc1-2 cDNA,T-A克隆到pMD18-T Simple栽体.Ki-67经BamH I和Cla I双酶切,Bc1-2经EcoR I和Xho I双酶切后,分别反向插入pVITR02的多克隆位点1(mcs1)和2(mcs2),构建单表达质粒pVITR02-AsKi-67扣pVITR02-AsBc1-2,再将Bc1-2EcoR I和Xho I双酶切,反向插入pVITR02-AsKi-67的mcs2,构建pVITR02-AsKi-67-AsBc1-2双表达质粒.结果限制性内切酶和测序表明单表达质粒pVITR02-AsKi-67和pVITR02-AsBc1-2以及双表达质粒pVITR02-AsKi-67-AsBc1-2构建成功.结论 本研究成功构建了pVITR02-AsKi-67和pVITR02-AsBc1-2单表达质粒,及pVITR02-AsKi-67-AsBc1-2双表达质粒.

关 键 词:Ki-67  Bc1-2  双顺反子载体pVITR02  反义RNA  真核细胞  表达载体的构建  Genes  Human  Vector  Identify  测序  限制性内切酶  结果  双表达质粒  多克隆  双酶切  BamH  Simple  逆转录扩增  方法  研究  基因治疗  肿瘤  栽体

Construct and Identify the Eukaryotic Co-expression Vector of Human Ki-157 and Bcl-2 Genes
LU Tianlong,CHEN Jianguo,HAN Yuewu,ZHANG Qinghua.Construct and Identify the Eukaryotic Co-expression Vector of Human Ki-157 and Bcl-2 Genes[J].World Sci-tech R & D,2008,30(2):202-204.
Authors:LU Tianlong  CHEN Jianguo  HAN Yuewu  ZHANG Qinghua
Abstract:
Keywords:
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