绿木霉ZY-01中纤维素酶EGⅣ基因的克隆及其在E.coli中的原核表达 |
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作者姓名: | 胡侨 罗伟 阮涛 侯亚利 黄皓 杨忠华 |
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作者单位: | 武汉科技大学化学工程与技术学院, 湖北 武汉,430081,武汉科技大学化学工程与技术学院, 湖北 武汉,430081,武汉科技大学化学工程与技术学院, 湖北 武汉,430081,武汉科技大学化学工程与技术学院, 湖北 武汉,430081,武汉科技大学化学工程与技术学院, 湖北 武汉,430081,武汉科技大学化学工程与技术学院, 湖北 武汉,430081 |
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基金项目: | 国家自然科学基金资助项目(21376184). |
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摘 要: | 以前期筛选到的纤维素酶高产菌株绿木霉T.viride ZY-01的总RNA为模板,利用RT-PCR技术克隆出内切葡聚糖酶EGⅣ基因,连接至pET-28a构建出重组质粒,并转化至E.coli BL21(DE3)中表达。该EGⅣ基因约有1089bp,在启动子T7lac的控制和IPTG的诱导下,目的基因成功地在原核细胞中表达。通过SDSPAGE检测得出目标蛋白分子量为39kDa,重组酶的比酶活为1.05U/mg,该酶最适pH值为6、最适反应温度为50℃。
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关 键 词: | 绿色木霉 纤维素酶 内切葡聚糖酶 EGⅣ基因 基因重组 原核表达 |
收稿时间: | 2015-12-11 |
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