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蛇足石杉内生真菌Shiraia sp. Slf14中III型聚酮合酶的表达、纯化及生物信息学分析
作者姓名:彭思露  杨慧林  李尔汉  王筱兰  朱笃
作者单位:江西师范大学生命科学学院,江西省亚热带植物资源保护与利用重点实验室,江西 南昌 330022;江西师范大学生命科学学院,江西省亚热带植物资源保护与利用重点实验室,江西 南昌 330022; 江西科技师范大学生命科学学院,江西省有机功能分子重点实验室,江西 南昌 330013
基金项目:国家自然科学基金,江西省青年科学基金,江西省教育厅基金,江西省亚热带植物资源保护与利用重点实验室开放基金
摘    要:竹红菌素是我国特有的一类苝醌类光敏色素,在开发新型抗肿瘤抗病毒药物、光敏活性农药及新型光电转换材料等方面应用前景广阔.聚酮合酶( Polyketide synthase,PKS)是合成竹红菌素的一种关键酶,通过全基因组测序及分析发现在Shiraia sp. Slf14中存在一个III型聚酮合酶基因.利用RT-PCR技术,以其总RNA为模板,扩增得到目的片段,并成功构建表达载体pET-22b(+)-PKSIII,采用Ni-NTA亲和层析法纯化目的蛋白,在大肠杆菌BL21( DE3)中成功表达出了目的蛋白,SDS-PAGE结果显示表达重组产物分子质量约为43 kDa,与理论值一致,为III型聚酮合酶的催化活性研究提供理论依据.

关 键 词:内生真菌  聚酮合酶  竹红菌素  基因克隆和表达
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