人和鼠脑cDNA文库的建立以及全长cDNA的批量分离 |
| |
引用本文: | 周严,胡松年,黄晓玮,周海军,谈昕煜,刘瑾,强华,彭小忠,强伯勤,袁建刚.人和鼠脑cDNA文库的建立以及全长cDNA的批量分离[J].自然科学进展,2002,12(4):377-380. |
| |
作者姓名: | 周严 胡松年 黄晓玮 周海军 谈昕煜 刘瑾 强华 彭小忠 强伯勤 袁建刚 |
| |
作者单位: | 中国医学科学院、中国协和医科大学、基础医学研究所、医学分子生物学国家重点实验室,北京100005 |
| |
基金项目: | 国家重点基础研究发展规划项目(G19988051000)和国家自然科学基金(批准号:39830070)资助 |
| |
摘 要: | 应用λZAP Express cDNA文库构建试剂盒构建了人3个月和8个月胎儿脑及大小鼠脑cD-NA文库.第2链cDNA经Sepharose CL-4B凝胶过滤层析后去除了较小的片段,使大片段cDNA具有较高的克隆效率.所建立的文库具有较长的插入片段.合并不同长度范围的人3个月胎儿脑cDNA片段,分别克隆入文库载体,获得了长片段、中片段、短片段及合并cDNA文库.从分级文库中各随机挑取300个克隆,经载体引物PCR扩增后,测定5'末端序列,一共获得894个表达序列标签(EST)序列.根据同源性比较结果将感兴趣的克隆环化后测定全长cDNA序列,得到了12条新的全长cDNA.这些文库的建立以及新EST,cDNA的分离为文库筛选和获得脑表达的新基因奠定了基础.
|
关 键 词: | cDNA文库 脑 EST |
本文献已被 维普 万方数据 等数据库收录! |
| 点击此处可从《自然科学进展》浏览原始摘要信息 |
| 点击此处可从《自然科学进展》下载免费的PDF全文 |
|