| 烟草反义Mlo基因表达载体的构建 |
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| 引用本文： | 邬晓勇,时羽杰,李杰,罗倩,王跃华,唐媛,孙雁霞.烟草反义Mlo基因表达载体的构建[J].成都大学学报(自然科学版),2017(4):333-337. |
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| 作者姓名： | 邬晓勇 时羽杰 李杰 罗倩 王跃华 唐媛 孙雁霞 |
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| 作者单位： | 成都大学药学与生物工程学院,四川成都,610106 |
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| 基金项目： | 成都大学药食同源植物资源开发四川省高校重点实验室开放基金 |
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| 摘 要： | 获得烟草反义Mlo基因的植物表达载体pBI 121-Mlo,为进行烟草遗传转化,获得该基因表达的缺陷型植株打下基础.从烟草叶片中提取总RNA,利用RT-PCR技术扩增得到Mlo基因的c DNA,以此为模板设计反义引物,通过PCR扩增出反义Mlo基因,将此反义Mlo基因与T载体连接,测序正确后再将此反义片段与植物表达载体pBI 121连接,构建烟草反义Mlo基因的植物表达载体pBI 121-Mlo.经Kan选择筛选出反义重组菌落,碱裂解法小量提取质粒后,用Xba I和Bam HI双酶切后再进行电泳鉴定.结果表明,目的基因已与植物表达载体pBI 121连接成功.成功构建了烟草反义Mlo基因表达载体pBI 121-Mlo.
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| 关 键 词： | Mlo基因 pBI121Mlo RT-PCR 反义片段 双酶切 |
Construction of Tobacco Anti-sense Mlo Gene Expression Vector |
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