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蜡样芽孢杆菌 LJ01 的鉴定及亚硝酸盐还原酶性质
作者姓名:刘冬梅罗彤晖  杨丹霞黄娟吴晖  余以刚李理
作者单位:华南理工大学 轻工与食品学院,广东 广州 510640
基金项目:国家自然科学基金资助项目(31101254);广东省自然科学基金资助项目(S2011010005679);广东省科技攻关项目(2013B020312002,2014A020208019,412051029089);华南理工大学中央高校基本科研业务费专项资金资助项目(D2116760)
摘    要:从豆瓣酱中筛选出一株能高效降解亚硝酸盐的菌株 LJ01,经鉴定为蜡样芽孢杆菌. 通过测定 LJ01 细胞中不同组分的酶活,研究了亚硝酸盐还原酶的初步定位.LJ01 经100mg/L 的 NaNO2 诱导后,用溶菌酶破壁,粗酶液先经阴离子 DEAE Sepharose Fast Flow层析柱分离,测定不同蛋白组分 a、b、c 降解亚硝酸盐的活力,利用 0.1 mol/L 无机电子供体丁二酸和亚硫酸钠等鉴定出组分 c 为亚硝酸盐还原酶,再经葡聚糖凝胶 G-150 层析柱分离,获得较纯的亚硝酸盐还原酶,每升发酵液可得到 0.54 mg 活性酶蛋白,酶蛋白活力达到 4004. 89 U/mg,得率为 2.37%,纯化后其 NiR 的比活力提高了 17. 57 倍. 经 SDS-PAGE 电泳后确定 LJ01 中亚硝酸盐还原酶的单体分子质量约为 30ku.

关 键 词:蜡样芽孢杆菌  亚硝酸盐还原酶  亚硝酸盐降解  16S rDNA  细胞定位   
收稿时间:2014-10-28
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